棉花SGT家族基因的克隆和纖維素合成相關(guān)蛋白的抗體制備.pdf

1、分類 號(hào) 密 級(jí)華 中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文棉花 S G T 家 族 基 因 的克 隆和 纖維素合 成 相 關(guān) 蛋 白的抗 體制 備C lo n in go fC o tto nS G TF a m illyG e n e sa n dA n tib o d yP r eP r a tio no fth eP r o te in sA sso eia te dw ithC e llu lo seS y n th e sis研 究 生指 導(dǎo)

2、 教 師指 導(dǎo) 小 組 :劉 緒彭 良才 教 授夏 濤 副教授彭 良才 教授夏 濤 副教授豐勝 求 副教 授謝 國(guó)生 副教授專業(yè) : 作物遺傳育種獲 得 學(xué)位 名稱 : 農(nóng) 學(xué)碩 士研 究方 向: 植物纖維素合成機(jī)理獲得 學(xué)位 時(shí) 間 : 2010 年 6 月華 中農(nóng)業(yè)大學(xué)植物科技學(xué) 院二 O 一 O 年六 月華 中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010 屆碩士研究生學(xué)位 論文2. 2. 5P C R 產(chǎn) 物 與載 體 連 接 . . . . . . .

3、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……142. 2 . 6E . coli 感 受 態(tài) 細(xì) 胞 制 備 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

4、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……142. 2. 7 轉(zhuǎn) 化 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……， . .

5、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……巧2 . 2. 8 外 源 片段 的檢 測(cè) 和 測(cè) 序 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

6、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……152. 2 . 9 R A C E .....................................................................................................…… 1 52. 2 .10 目的蛋 白的原 核 表 達(dá) 和 純 化 . . . . . . . . . . .

7、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……162. 2.11 真 核表 達(dá) 載 體 構(gòu) 建 和 酵 母 轉(zhuǎn) 化 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

8、 . . . . . . . . . . . . . . . . …… 213 結(jié) 果 與 分 析 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

9、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……243.1Gh S G TI 和 Gh S G TZ 的全 長(zhǎng) cD N A 克 隆 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . …… 243.1.1 序 列 比對(duì)

10、 和 引物 設(shè) 計(jì) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . …… 243.1. 2Gh SG TjcD N A 序 列 全 長(zhǎng) 的獲 得 . . . . . . . . . .

11、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . …… 253.1. 3Gh S G 刀 全 長(zhǎng) cD N A 獲 得 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

12、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . …… 263. 2Gh S G Tj 和 G hS G TZ 基 因序 列 獲 得 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . …… 273.

13、2.1G hSG Tj 基 因擴(kuò) 增 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . …… 273. 2. 2Gh S G 幾 基 因擴(kuò) 增 . . . . . .

14、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……283 . 3G hS G T] 和 Gh S G TZm R N A 表 達(dá) 分 析 . . …， . . . . . . . .

15、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……283. 4Gh SG T I 和 Gh SG T Z 生 物 信 息 學(xué) 分 析 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

16、. . . . . . . . . . . . . …… 293. 4.1G hSG T I 和 G hSG T Z 序 列 比對(duì) 和 保 守域 分 析 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . …… 293. 4.2G hSG T I 和 G hSG T Z 與其 他 物 種 SG T 蛋 白比對(duì) 和 聚 類 分 析 . . . .

17、. . . . . . …… 303. 4.3G h SG T I 和 G h SG T Z 跨 膜 結(jié) 構(gòu) 分 析 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……313. 4.4G h SG T I 和 G h SG T Z 分 子 量 和 等 電點(diǎn) 分 析 . . .

18、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……323. 5Gh so T 一 、end o一 p一 l， 4一 gfueanase、p一 l， 3一 gfueanase 和 C al l osesynthase 抗 原 合 成和 抗 體 制 備 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

19、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……323. 5.1G hSG T I 序 列分 析 和 抗 原 區(qū)段 選 擇 . . . . .

20、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . …… 333. 5. 2E ndo 一 p一 1， 4一 gluc anase 序 列 分 析 和 抗 原 區(qū)段 選 擇 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……

21、333. 5. 3 p一 l， 3一 gtucanase 抗 原 區(qū)段 選 擇 和 抗 原 表 位 分 析 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……343. 5. 4c al osesynthase 抗 原 區(qū)段 選 擇 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

22、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……353. 5. 5 原核表 達(dá) 載 體 的構(gòu) 建 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .