納米靶向遞藥系統(tǒng)AS1411-PLGa-DOX的構(gòu)建及其對(duì)腦膠質(zhì)瘤的治療作用與機(jī)制研究.pdf

1、背景:
　　惡性腫瘤給人類健康和社會(huì)發(fā)展帶來了沉重的傷害。由于腫瘤呈侵襲性生長，手術(shù)難以完全根除，加之放療、化療的毒副作用大，因此，尋找最佳的是腫瘤綜合治療的手段迫在眉睫。隨著材料學(xué)、生物醫(yī)學(xué)及納米科學(xué)的交叉融合，納米靶向制劑逐漸引起科學(xué)家的重視。納米靶向給藥系統(tǒng)是目前研究的熱點(diǎn)，它具有可靶向性，提高藥物穩(wěn)定性及緩釋性等特點(diǎn)。
　　聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)被廣泛用于載藥系統(tǒng)的研究，主要是由于具有生物相容性、低毒性和

2、可降解性等良好的特性。鹽酸多柔比星（又稱阿霉素，DOX），對(duì)多種腫瘤均具有顯著的抑制作用，它但它的骨髓抑制、心臟損傷等不良反應(yīng)成為DOX治療腫瘤的瓶頸。核酸適配體(AS1411)具有特異性強(qiáng)的靶標(biāo)結(jié)合能力、易于穿透腫瘤組織、易于體外修飾等優(yōu)點(diǎn)，并特異性結(jié)合于核仁蛋白(C23)，以發(fā)揮其抗腫瘤的重要作用。C23是細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白，它可調(diào)控細(xì)胞增殖生長過程，其中p38絲裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)在細(xì)胞凋亡的過程所起的重要作用越來越來

3、引起廣大科學(xué)研究者的重視。
　　目的:
　　本課題以DOX為抗腦膠質(zhì)瘤藥物，以PLGA為納米載體，AS1411偶聯(lián)于PLGA納米微球，以構(gòu)成納米靶向遞藥系統(tǒng)AS1411-PLGA-DOX，以發(fā)揮其特異性靶向抗腦膠質(zhì)瘤的作用，并進(jìn)一步明確其抗腦膠質(zhì)瘤作用的分子機(jī)制。
　　方法:
　　采用復(fù)乳乳化溶劑揮發(fā)法及碳二亞胺兩步縮合反應(yīng)法進(jìn)行AS1411-PLGA-DOX的制備;并對(duì)其進(jìn)行表征;再從體內(nèi)外兩方面明確AS141

4、1-PLGA-DOX抗腦膠質(zhì)瘤的作用;最后從分子生物學(xué)方面，以腫瘤凋亡的分子機(jī)制為著眼點(diǎn)，深入研究AS1411-PLGA-DOX抗腦膠質(zhì)瘤的內(nèi)在分子機(jī)制。
　　結(jié)果:
　　1.AS1411-PLGA-DOX為球形的納米粒，大小(245±42.6nm)分布較規(guī)整，表面較光滑;多分散系數(shù)0.212±0.023，電位-36.2±1.8mV，LC％為1.72±0.06％、EE％為88.1±4.7％;體外釋放性為47.7±3.9.％(

5、pH=7.4)，57.0±4.6％(pH=5)，其結(jié)果展現(xiàn)出具有pH響應(yīng)性釋放的特性;溶血率為0.244％以展現(xiàn)出良好的生物形容性。同時(shí)，AS1411-PLGA-DOX的熒光強(qiáng)度顯著高于PLGA-DOX，且被細(xì)胞攝入內(nèi)部并釋藥，細(xì)胞定量定位的結(jié)果表明其具有一定的靶向性。
　　2.體外實(shí)驗(yàn)表明，AS1411-PLGA-DOX對(duì)U87細(xì)胞生長抑制率的變化呈現(xiàn)濃度依賴性，并可將細(xì)胞阻滯于G2/M，S期，其抑制腫瘤的機(jī)制可能與AS1411

6、-PLGA-DOX激活p38MAPK通道，上調(diào)p38的表達(dá)，下調(diào)C23、Bcl-2、Bcl-XL的表達(dá)有關(guān)。
　　3.體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明，AS1411-PLGA-DOX可抑制皮下荷瘤裸鼠的瘤體生長，延長荷瘤裸鼠的生存時(shí)間，其進(jìn)一步的分子生物學(xué)機(jī)制與細(xì)胞實(shí)驗(yàn)相一致。
　　結(jié)論:
　　本課題已成功構(gòu)建具有靶向作用的納米遞藥系統(tǒng)AS1411-PLGA-DOX，同時(shí)其體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，AS1411-PLGA-DOX是一種有潛在開發(fā)