骨-軟骨生長(zhǎng)因子緩釋納米微球研究.pdf

1、組織工程技術(shù)在上個(gè)世紀(jì)80年代就已經(jīng)有人開(kāi)始研究，它代表著醫(yī)學(xué)研究已經(jīng)開(kāi)始進(jìn)入到器官克隆新時(shí)代。骨組織工程的研究是組織工程的一個(gè)重要分支技術(shù)，為當(dāng)今骨科醫(yī)學(xué)解決關(guān)節(jié)軟骨損傷修復(fù)的研究熱點(diǎn)方向，并取得了很多研究成果，但在研發(fā)過(guò)程中也伴隨著新的問(wèn)題亟待解決。
　　 修復(fù)損傷器官的組織工程技術(shù)從工程支架，種子細(xì)胞和生長(zhǎng)因子三大方面進(jìn)行研究。生長(zhǎng)活性因子在人體內(nèi)的半衰期短，馬上就會(huì)被代謝稀釋?zhuān)耆荒軡M(mǎn)足組織自身修復(fù)再生的需要。研制生長(zhǎng)

2、因子緩釋微球，其目的在于延長(zhǎng)生長(zhǎng)因子在體內(nèi)的存活時(shí)間，為應(yīng)用組織工程技術(shù)修復(fù)軟骨損傷奠定物質(zhì)基礎(chǔ)。
　　 生長(zhǎng)因子屬蛋白類(lèi)物質(zhì)容易被體內(nèi)蛋白酶降解，導(dǎo)致其半衰期短，難以滿(mǎn)足組織工程修復(fù)損傷的需要。制備載生長(zhǎng)因子緩釋納米微球，旨在延長(zhǎng)其在體內(nèi)的存活時(shí)間，以一定的緩釋率釋放，誘導(dǎo)種子細(xì)胞分化并形成骨或軟骨組織。我們創(chuàng)建聚羥基丁酸與羥基辛酸(PHBHOx)載骨形成蛋白(rBMP)納米微球制備方法，研發(fā)rBMP-PHBHOx緩釋納米微球

3、，為關(guān)節(jié)一體化支架硬骨區(qū)細(xì)胞提供生長(zhǎng)因子。分別采用溶劑揮發(fā)法、靜電紡絲法、W1/O/W2超聲乳化法制備微球，并以載藥量、包封率為技術(shù)指標(biāo)經(jīng)正交試驗(yàn)優(yōu)化了超聲乳化法制備納米微球的操作條件，以磷酸鹽緩沖液作為釋放介質(zhì)(pH7.4)考察微球的體外緩釋性能，并通過(guò)真空泵產(chǎn)生負(fù)壓將納米微球膠體液吸納到骨組織工程支架的空隙中去，用電鏡掃描，觀察兩者的粘附性和相容性。在以上三種方法中，靜電紡絲法制備的微球，顆粒較大且在高壓電流作用下可使其rBMP失活

4、;溶劑揮發(fā)法制備的微球易粘連并會(huì)形成較大顆粒群。超聲乳化法制備的微球粒徑小，顆粒圓潤(rùn)，分散性較好。經(jīng)制備條件優(yōu)化，主要制備條件為PHBHOx濃度為6.5％，乳化劑Tween80為5％及Span80為1％，生長(zhǎng)因子濃度10％，PVA濃度為3％，有機(jī)相水相體積比為3∶1。制備的納米微球平均粒徑為(564.75±53.46)nm，載藥量為(1.172±0.262)×10-2％，包封率為（83.50±2.82）％，體外釋藥率13天可達(dá)87.89