定向生長(zhǎng)因子控緩釋膠原基引導(dǎo)組織再生材料的研究.pdf

1、引導(dǎo)組織再生(guided tissue regeneration，GTR)材料是生物材料的重要組成部分，依靠機(jī)械屏障等作用，選擇性地引導(dǎo)細(xì)胞向受損傷的部位附著、增生，可以達(dá)到組織修復(fù)目的。組織病損在修復(fù)過(guò)程的不同時(shí)期表現(xiàn)出不同的病理變化，引導(dǎo)組織再生材料應(yīng)根據(jù)上述病理特點(diǎn)進(jìn)行設(shè)計(jì)，以發(fā)揮其功能。 本研究在對(duì)膠原交聯(lián)劑改良優(yōu)化的基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)并制備了一種具有雙層疏密結(jié)構(gòu)不同的膠原基材料，將載生長(zhǎng)因子的殼聚糖—肝素納米粒子引入該材料

2、，制備了一種定向生長(zhǎng)因子控緩釋膠原基引導(dǎo)組織再生材料；考察了該材料在不同時(shí)間對(duì)模型蛋白的體外釋放行為，并通過(guò)體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，考察了復(fù)合材料的細(xì)胞相容性和復(fù)合生長(zhǎng)因子的活性。研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下： 1)以D—核糖為交聯(lián)劑，對(duì)膠原膜進(jìn)行交聯(lián)，經(jīng)XPS，IR，AFM，SEM表征結(jié)果表明，D—核糖可以使膠原材料有效交聯(lián)。D—核糖與甲醛交聯(lián)膠原膜對(duì)Ⅰ型膠原酶的耐受性研究結(jié)果顯示，二者耐受性相同。 2)采用兩種不同質(zhì)量比的殼聚糖和肝

3、素制備了納米粒子，對(duì)兩種納米粒子進(jìn)行DLS、透射電鏡和紅外表征。結(jié)果表明，兩種質(zhì)量比的殼聚糖與肝素，都可以形成均勻的類(lèi)球形納米粒子，二者表面電位和粒徑不同。將殼聚糖—肝素納米粒子復(fù)合于凍干和風(fēng)干已交聯(lián)膠原膜材料之間，制備了膠原基復(fù)合材料，表面形貌表征顯示，該材料兩側(cè)的疏松程度差異明顯。 3)利用流池法，考察了復(fù)合材料在兩種不同釋放介質(zhì)中內(nèi)對(duì)模型蛋白HSA的釋放行為。對(duì)50小時(shí)內(nèi)蛋白釋放量進(jìn)行比較，結(jié)果表明，材料對(duì)HSA具有緩釋作

4、用，但在此釋放時(shí)間范圍內(nèi)，釋放介質(zhì)的不同流向?qū)︶尫欧较驔](méi)有顯著影響，膠原酶釋放介質(zhì)對(duì)材料的釋放速率有影響。 4)體外培養(yǎng)L929細(xì)胞，接種于復(fù)合和未復(fù)合bFGF膠原基雙層引導(dǎo)組織再生材料以及交聯(lián)的風(fēng)干膠原膜表面，考察了種植后3天和5天時(shí)細(xì)胞的生長(zhǎng)情況。結(jié)果表明，所有材料均具有良好的細(xì)胞相容性，材料對(duì)生長(zhǎng)因子有一定的定向控制釋放作用，所釋放bFGF保持生物活性。 本研究對(duì)定向生長(zhǎng)因子控緩釋雙層引導(dǎo)組織再生修復(fù)材料進(jìn)行了初步