離子誘導(dǎo)柞蠶絲素蛋白微球的形成及其在藥物緩釋上的應(yīng)用.pdf

1、桑蠶絲素蛋白由于其優(yōu)異的生物相容性、可生物降解性和透氣透氧性而廣泛應(yīng)用在手術(shù)縫合線、傷口輔料、酶固定化材料、組織工程以及藥物緩釋材料等方面。柞蠶絲素蛋白除具有桑蠶絲素蛋白在生物醫(yī)藥領(lǐng)域的優(yōu)點(diǎn)外,它還含有RGD三肽序列,作為傷口敷料、組織工程支架材料、藥物緩釋微球材料和細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)等方面有比家蠶絲素更好的生物相容性和效果。本文采用一種全新的方法——離子誘導(dǎo)制備柞蠶絲素蛋白微球,并研究了載不同電荷小分子藥物的緩釋效果。
　　研究發(fā)現(xiàn),

2、再生柞蠶絲素蛋白溶液在存放的過程中容易發(fā)生結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變,由溶液狀態(tài)轉(zhuǎn)變成微球結(jié)構(gòu)。在這個(gè)過程中絲素顆粒從3nm逐漸增長(zhǎng)到1.5μm。在此實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上,本文在溶液中加入不同價(jià)態(tài)的陽離子,研究其對(duì)于微球形成過程的影響。結(jié)果顯示,離子誘導(dǎo)柞蠶絲蛋白形成微球呈圓形,形狀規(guī)整,分布均勻,微球產(chǎn)率高可達(dá)95％以上。高價(jià)態(tài)的陽離子能夠縮短微球形成時(shí)間,形成微球的尺寸較小,其直徑約為0.1-0.4um,可被生物降解。本文采用內(nèi)源熒光法和外源熒光法探討了離子誘

3、導(dǎo)柞蠶絲素微球的形成機(jī)理,認(rèn)為陽離子誘導(dǎo)絲素蛋白快速形成微球是基于疏水作用和電荷作用導(dǎo)致絲素分子高度伸展,迅速β化,最終締合成顆粒。
　　在此基礎(chǔ)上,采用帶負(fù)電荷的小分子藥物布洛芬鈉鹽、不帶電荷的布洛芬、帶正電荷的阿霉素作為不同電荷模型藥物裝載入柞蠶絲素微球中。研究結(jié)果表明:藥物的載藥率以及包封率與藥物的投入量有關(guān),由于柞蠶絲素微球本身帶負(fù)電荷,所以載不同電荷的藥物微球載藥率及包封率有很大不同。帶正電荷的阿霉素藥物微球相比其他兩種

4、藥物具有較高的載藥率及包封率,當(dāng)阿霉素增加到16％時(shí),載藥率可達(dá)11.4％,包封率可達(dá)82.5％;而帶負(fù)電荷的布洛芬鈉鹽藥物微球的載藥率及其包封率則較低,當(dāng)布洛芬鈉鹽的加入量高達(dá)60％時(shí),其載藥率僅為2.5％,包封率僅為4.08％。不帶電荷的布洛芬,其載藥率荷和包封率則處于兩者之間。載帶不同電荷的藥物微球的釋放都具有pH敏感特征,體外釋放實(shí)驗(yàn)表明載正電荷阿霉素微球的釋放,在低pH(5.2)環(huán)境下釋放較快,之后釋放較慢,在11天后仍有65

5、.4％左右藥物未釋放,說明載正電荷阿霉素絲素微球具有明顯的緩釋性能。而載帶負(fù)電荷布洛芬鈉鹽微球,具有明顯的突釋現(xiàn)象,且在高pH(8.0)環(huán)境下突釋現(xiàn)象尤其明顯,1小時(shí)就釋放了88％。而載不帶電荷布洛芬藥物微球則具有較為明顯的緩釋性能,在低pH(5.2)環(huán)境下釋放較慢,10小時(shí)后累積釋藥率為80％左右。
　　在此基礎(chǔ)上探討了離子誘導(dǎo)絲素蛋白形成微球的細(xì)胞相容性及其載阿霉素藥物的抑瘤性能。結(jié)果表明離子誘導(dǎo)制備的柞蠶絲素蛋白微球能夠支持