蒜氨酸檢測方法及提取分離工藝研究.pdf

1、蒜氨酸具有獨(dú)特的藥理活性,高蒜氨酸大蒜制品和高純藥用蒜氨酸具有極高的商業(yè)價(jià)值,但是大蒜中蒜酶對蒜氨酸的催化作用制約著蒜氨酸含量的準(zhǔn)確測定和蒜氨酸高效分離純化工藝的開發(fā).該文針對在蒜酶的作用下,蒜氨酸極易分解的問題,研究了多種條件下,蒜氨酸和蒜酶的作用,結(jié)果表明:在適溫、隔氧條件下對蒜酶原位漂燙鈍化是保護(hù)蒜氨酸的較好方法.其較佳的工藝條件為:以脫氧水為漂燙介質(zhì),漂燙溫度為80℃,漂燙時(shí)間為20min.在適溫、隔氧條件下對蒜酶進(jìn)行原位漂燙鈍

2、化保護(hù)蒜氨酸,建立了大蒜中蒜氨酸含量測定的新方法,即蒜酶原位鈍化—固相萃取—反相高效液相色譜—紫外檢測法.該法以Supelclean LC-C18固相萃取柱純化樣品,色譜條件為:色潛柱TMS柱,ODS保護(hù)柱;紫外檢測波長214nm;水為流動(dòng)相;流速0.4ml/min.在此色譜條件下RSD小于1.33％(n=6),加樣回收率96.0％~99.5％.與衍生化法比較,檢測不受蒜酶影響,因此能更加準(zhǔn)確測定蒜氨酸的含量.最后,在蒜酶原位鈍化的條件

3、下,本文對大蒜中蒜氨酸的提取分離工藝進(jìn)行了具體研究,得到了較佳的蒜氨酸提取分離工藝參數(shù):1、蒜酶鈍化后,進(jìn)行蒜氨酸的浸提,較佳的佳浸提條件為:乙醇濃度60％,溫度50℃,時(shí)間2h,固液比1:5(g/ml).提取三次后蒜氨酸基本浸提完全,浸提得率為4.68 mg/g,粗提物中蒜氨酸含量為1.75％.2、以醇沉法對蒜氨酸粗提物進(jìn)行純化,綜合考慮含量和得率,粗提物溶液體積和乙醇的體積比為1:8時(shí)純化效果最好,純化后所得大蒜提取物中蒜氨酸含量為