竹葉多糖提取、分離及檢測技術(shù)研究.pdf

1、本研究以毛竹為研究對象，對竹葉多糖的提取、純化、檢測及活性進(jìn)行研究，通過單因素試驗和正交試驗考察了溫度、時間、固液比、提取次數(shù)對多糖提取率的影響，同時對水提取、超聲波提取和微波提取三種提取方法進(jìn)行了比較，利用葡聚糖凝膠和纖維素柱層析分離技術(shù)對多糖進(jìn)行純化，并運用薄層色譜和氣相色譜考察了其單糖組成，采用高通量藥物篩選模型對多糖的抗腫瘤活性進(jìn)行了探討，試驗結(jié)果如下： 1.建立了苯酚-硫酸法測定竹葉多糖含量的方法。在波長為490nm，

2、以無水葡萄糖為對照品，20～100μg/ml范圍內(nèi)，濃度和吸光度呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為Y=7.275X+0.0004，相關(guān)系數(shù)R2為0.9989. 2.優(yōu)化了竹葉多糖提取工藝參數(shù)，首次將超聲波和微波技術(shù)應(yīng)用到竹葉多糖的提取工藝，得到其最佳提取條件，水提最佳浸提參數(shù)為：溫度80℃，時間90min，固液比1∶25，浸提3次，多糖得率為0.661﹪；超聲波提取最佳浸提參數(shù)為：溫度70(℃，時間20min，固液比1∶20，浸提3次

3、，多糖得率為0.708﹪；微波提取最佳浸提參數(shù)為：微波功率500W，固液比1∶15，時間2min，浸提3次，多糖得率為0.655﹪。 3.竹葉粗多糖經(jīng)Sevag法脫蛋白，DEAE-纖維素柱層析，以濃度為0、0.05M、0.1M、0.3M、0.5M的NaCl溶液梯度洗脫，得到四個竹葉多糖(Bamboopolysaccharide，BPS)：BPS1、BPS2、BPS3、BPS4，其得率分別為46.45﹪、4.31﹪、1.62﹪、0

4、.53﹪；BPS1再經(jīng)DEAE-纖維素、SephadexG-75凝膠柱層析得到BPS11；用SephadexG-100柱層析鑒定了它們的純度，用HPTLC和GC測定了它們的單糖組成為：鼠李糖∶阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖=2.91∶9.27∶4.42∶6.38∶25.59∶9.44。 4.運用高通量藥物篩選模型對竹葉多糖的抗腫瘤活性進(jìn)行了考察，結(jié)果表明，在竹葉多糖劑量為10μg/ml時，對THP-1(單核細(xì)胞白血病細(xì)胞