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文檔簡(jiǎn)介
1、前言:
樹(shù)突狀細(xì)胞(dendritic cells,DC)是指具有典型樹(shù)突狀形態(tài)、膜表面高度表達(dá)主要組織相容性復(fù)合體(major histocompatibility complex,MHC)Ⅰ類和Ⅱ類分子,能有效攝取、加工、提呈抗原,并能顯著刺激初始型T淋巴細(xì)胞增殖的一類細(xì)胞。作為目前發(fā)現(xiàn)的具有相對(duì)特異性表面標(biāo)志的功能最強(qiáng)的專職抗原提呈細(xì)胞(antig-en presenting cell,APC),DC在調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答過(guò)程中
2、起著雙重作用,一方面,DC在觸發(fā)和調(diào)節(jié)非特異性免疫反應(yīng)和特異性免疫反應(yīng)中起關(guān)鍵作用;另一方面,DC也能夠調(diào)節(jié)T細(xì)胞反應(yīng),產(chǎn)生外周免疫耐受,表現(xiàn)出功能上的高度可塑性。因此,DC是機(jī)體免疫反應(yīng)的始動(dòng)者,參與機(jī)體多種自身免疫性疾病、免疫缺陷病、腫瘤及一些炎癥反應(yīng)的病理過(guò)程,在機(jī)體抗感染免疫及腫瘤應(yīng)答免疫中起重要作用。甘草甜素(glyeyrrhizin,GL)是中藥甘草的主要成分,是從藥用植物甘草根、莖中提取的一種有效活性成分,具有高甜度、低熱
3、量、安全無(wú)毒的特點(diǎn),具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎、抗病毒、抗變態(tài)反應(yīng)等作用,現(xiàn)運(yùn)用于臨床各種疾病的治療,取得了明顯確切的療效。鑒于甘草甜素和樹(shù)突狀細(xì)胞在免疫系統(tǒng)中的顯著地位,本實(shí)驗(yàn)就甘草甜素對(duì)小鼠髓系DC2.4細(xì)胞株表型及生物學(xué)功能的調(diào)節(jié)作用進(jìn)行研究,并探討其免疫刺激功能及機(jī)制。
實(shí)驗(yàn)方法:
采用本教研室保存并傳代的C57/BL-6小鼠髓系DC2.4細(xì)胞株及甘草甜素進(jìn)行實(shí)驗(yàn),復(fù)蘇培養(yǎng)細(xì)胞,應(yīng)用MTT方法、掃描電鏡技術(shù)、流式細(xì)胞
4、儀檢測(cè)技術(shù)、體外刺激淋巴細(xì)胞增殖、酸性磷酸酶活性檢測(cè)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等檢測(cè)DC2.4細(xì)胞表型和生物學(xué)功能的各種指標(biāo)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
1、甘草甜素處理后,DC2.4細(xì)胞表面可見(jiàn)很長(zhǎng)的突起;而未作處理的細(xì)胞(即RPMI1640組)的突起很短甚至沒(méi)有突起。
2、甘草甜素處理的DC2.4細(xì)胞能夠上調(diào)其表面MHC-Ⅱ、CD86和CD40分子的表達(dá)。
3、甘草甜素組DC2.4細(xì)胞,與適宜比例的淋巴細(xì)胞培養(yǎng),可
5、促進(jìn)淋巴細(xì)胞的增殖。
4、甘草甜素處理的DC2.4細(xì)胞中的酸性磷酸酶活性低于RPMI1640組。
5、甘草甜素處理的DC2.4細(xì)胞比未做任何處理的對(duì)照組(即RPMI1640組)IL-12分泌量增加。
結(jié)論:
1、適宜濃度的甘草甜素能夠顯著促進(jìn)DC2.4細(xì)胞形態(tài)學(xué)的成熟。
2、適宜濃度的甘草甜素顯著增加DC2.4細(xì)胞的MHC-Ⅱ,CD40和CD86分子的表達(dá),刺激DC2.4細(xì)胞發(fā)成熟。
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