殼聚糖磁性微球的制備及其對(duì)胰蛋白酶的固定化研究.pdf

1、高分子磁性微球是近20年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種新型功能材料，已在生物化工、細(xì)胞學(xué)、生物醫(yī)學(xué)工程等領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。將高分子殼聚糖和磁性納米粒子結(jié)合制備殼聚糖磁性微球，具有重要的學(xué)術(shù)意義和應(yīng)用價(jià)值。殼聚糖磁性微球因其表面具有與生物活性物質(zhì)反應(yīng)的活性羥基和氨基，可被廣泛用于生物活性物質(zhì)的載體，同時(shí)又因其具有磁性，在外加磁場(chǎng)作用下能快速分離，使原來(lái)昂貴、低效的分離技術(shù)變?yōu)榈土⒏咝?。殼聚糖磁性微球作為新型的功能高分子材料在精?xì)化工、環(huán)境監(jiān)測(cè)、固定

2、化酶、靶向藥物、免疫分析、細(xì)胞分離等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用前景。 本論文主要包括以下兩個(gè)方面的內(nèi)容： (1)以Fe/C為磁性內(nèi)核，液體石蠟為分散介質(zhì)，Span-80為乳化劑，環(huán)氧氯丙烷做交聯(lián)劑，采用反相懸浮包埋法制備了殼聚糖磁性微球。用TEM、AFM、Zeta電位一粒度儀、IR等對(duì)微球進(jìn)行了表征，并對(duì)微球表面的活性基團(tuán)數(shù)量進(jìn)行了測(cè)定，大微球表面氨基的含量為63.9 μmol/g(3.85×10<'6>個(gè)/mg)，羥基的含量為

3、13.0 μmol/g(7.81×10<'15>個(gè)/mg)；小微球表面的氨基含量為168 μmol/g(10.1×10<'16>個(gè)/mg)，羥基含量為25.2 μmol/g(15.2×10<'15>個(gè)/mg)。研究了用戊二醛活化、Cibacron Blue F3G-A修飾后的微球?qū)εＱ灏椎鞍椎奈叫阅?。?shí)驗(yàn)結(jié)果表明：當(dāng)牛血清白蛋白濃度為1.50mg/mL時(shí)，經(jīng)戊二醛活化的大微球?qū)εＱ灏椎鞍椎娘柡臀搅繛?4.6 mg/g，小微球的飽

4、和吸附量為46.3 mg/g；用Cibacron Blue F3G-A修飾后的大微球吸附蛋白量達(dá)到56.7 mg/g，小微球?yàn)?6.2 mg/g。 (2)固定化酶比游離酶具有多方面的優(yōu)點(diǎn)。本文以殼聚糖磁性微球?yàn)檩d體，戊二醛為交聯(lián)劑制備固定化胰蛋白酶，研究了固定化反應(yīng)中戊二醛濃度、給酶量、pH值對(duì)固定化胰蛋白酶活力的影響。大小兩種粒徑固定化胰蛋白酶的最適pH均為6.5～7.5，最適溫度均為80°C，K<,m>值分別為7.08和6.