應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)探討蛋白激酶C信號(hào)途徑在低氧性肺動(dòng)脈高壓發(fā)病機(jī)制中的作用.pdf

1、該研究在以往工作的基礎(chǔ)上采用組織及細(xì)胞原位雜交、斑點(diǎn)雜交、RT-PCR、免疫組化等分子生物學(xué)技術(shù)及四甲基偶氮唑鹽(MTT)微量比色法,通過低氧大鼠動(dòng)物模型及細(xì)胞培養(yǎng)等方法,進(jìn)一步觀察PKCα在不同低氧時(shí)間在體和離體PA SMC和肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞PAEC中mRNA表達(dá)水平的變化,并觀察PKC對(duì)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖、凋亡、結(jié)構(gòu)型一氧化氮合酶(cNOS)和ET-1 mRNA表達(dá)的影響,以從整體、細(xì)胞和分子水平進(jìn)一步探討PKC在HPH的發(fā)病機(jī)制中

2、的作用;此外我們還觀察了燈盞花素和銀杏葉制劑對(duì)HPH的治療作用及對(duì)低氧PA SMC中PKCα mRAN表達(dá)的影響,以評(píng)價(jià)其作用機(jī)制及應(yīng)用價(jià)值,為HPH的治療尋找新的更為有效治療藥物.結(jié)論:1.低氧可促進(jìn)在體和離體培養(yǎng)的PA SMC和PAEC中PKCαmRNA的表達(dá),尤以腺泡內(nèi)PA SMC的變化最明顯;PCK可促進(jìn)正常和低氧PA SMC的增殖、抑制細(xì)胞凋亡,PKC信號(hào)傳導(dǎo)通道在HPH的形成機(jī)制中起重要作用,可能通過調(diào)控PA SMC的增殖與

3、凋亡、血管的重塑及血管張力而參與了肺動(dòng)脈高壓的形成,其中PKCα可能起較為關(guān)鍵的作用.2.PKC在HPH的形成機(jī)制中的作用可能是通過抑制cNOS mRNA和增加ET-1 mRAN在PA SMC和PAEC的表達(dá)來對(duì)NO和ET-1的調(diào)控來實(shí)現(xiàn)的,PKC信號(hào)通道可能作用在NO和ET-1的上游,但其機(jī)制還有待于進(jìn)一步的研究.3.燈盞花素有明顯降低大鼠HPH的作用,其機(jī)制可能是通過抑制PKCα mRAN的表達(dá)作用于PKC信號(hào)通道而抑制低氧PA S