異硫氰酸苯已酯(PHI)誘導(dǎo)前列腺癌PC3細(xì)胞凋亡的分子機制研究.pdf

1、目的:觀察異硫氰酸苯己酯(PHI)對前列腺癌PC3細(xì)胞株增殖、凋亡的作用，研究PHI對前列腺癌細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白、組蛋白乙?；⒓谆?、Akt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響，闡述誘導(dǎo)凋亡的分子機制。 方法:采用MTT方法繪制PHI作用后PC3細(xì)胞的生長曲線；采用TUNNEL方法檢測PHI對PC3細(xì)胞凋亡的影響；用蛋白免疫印跡法(Western Blot)觀察PC3細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白BcL-2，caspase-9、caspase-3、McL-1、

2、Cyt-C、XIAP的變化及組蛋白乙?；疕3、H4，組蛋白甲基化H3K9、H3K4水平的變化；同時研究Akt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路蛋白表達(dá)水平的變化。 結(jié)果:(1) PHI能抑制PC3細(xì)胞增殖，IC50約為20μmol/L，并能誘導(dǎo)PC3細(xì)胞凋亡，隨作用時間延長及濃度的增加，凋亡率漸上升，呈時效及量效關(guān)系；(2)PHI下調(diào)PC3細(xì)胞BcL-2，caspase-9、caspase-3、McL-1、Cyt-C、XIAP的表達(dá)，呈時效及量效變化

3、；(3) PHI處理3小時就可見增加PC3細(xì)胞組蛋白乙?；疕3、H4，組蛋白甲基化H3K4水平，降低甲基化H3K9水平；(4) PHI處理后3小時PC3細(xì)胞Akt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路Akt及p-Akt均未見明顯變化，而作用7小時后，總蛋白Akt、mTOR、p70S6K的表達(dá)變化不明顯，而磷酸化蛋白p-Akt、p-mTOR、p-p70S6K均表達(dá)下降。 結(jié)論:(1) PHI可抑制PC3細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)其凋亡，可能與激活細(xì)胞內(nèi)源性凋亡通路有