玻璃體內(nèi)注射用微球的制備.pdf

1、微球制劑是一種用適宜高分子材料為載體包裹或吸附藥物而制成的球形或類(lèi)球形的微粒。其直徑一般在微米數(shù)量級(jí)，直徑小于500nm者稱(chēng)為納米粒[1]。藥物制成微球后具有緩釋長(zhǎng)效和靶向作用等優(yōu)點(diǎn)。它在體內(nèi)通過(guò)擴(kuò)散、材料的溶解和材料的降解三種方式釋放藥物。 眼部給藥是眼科用藥的重要途徑之一，但由于角膜屏障的存在，淚液的稀釋作用和淚道的引流等原因，許多眼用制劑的生物利用度較差，在治療應(yīng)用時(shí)受到了限制，尤其是治療眼后段疾病。為了在玻璃體內(nèi)獲得并維

2、持較高的藥物濃度，必須采用反復(fù)玻璃體腔內(nèi)注射給藥。這樣增加了患者的痛苦，進(jìn)一步增加了手術(shù)操作的困難和產(chǎn)生并發(fā)癥的危險(xiǎn)。另一方面，藥物可經(jīng)鼻腔、口腔等途徑吸收，毒副作用增強(qiáng)。因此，近年來(lái)許多眼科研究者正在探索眼部新的載藥系統(tǒng)，以求較長(zhǎng)時(shí)間地維持藥物濃度，減少系統(tǒng)性吸收，減少并發(fā)癥，達(dá)到治療目的。生物降解性微球，具有制備較簡(jiǎn)單，穩(wěn)定性較好，成本較低等優(yōu)點(diǎn)，微球制劑可混懸在介質(zhì)中用作滴眼劑或眼內(nèi)注射劑，減少眼內(nèi)不適感，微球制劑還可提高藥物的靶

3、向作用。因此，微球眼用給藥系統(tǒng)逐漸得到更多的肯定。 本研究以生物可降解乙交酯和丙交酯的無(wú)規(guī)共聚物(PLGA)為載體材料，采用W/O型乳化-溶劑揮發(fā)方法，以地塞米松為模型藥物制備微球；采用正交實(shí)驗(yàn)法研究影響微球制備的工藝條件，考察了微球的粒徑大小與分布，建立HPLC測(cè)定微球中地塞米松的方法，測(cè)定微球的載藥量和包封率，評(píng)價(jià)載藥微球的體外釋放行為。研究結(jié)果表明，影響微球包封率和微球大小的因素次序?yàn)椋和馑郟VA濃度(﹪，w/v)＞有機(jī)

4、相PLGA濃度(﹪，w/v)＞投藥比[=投藥量/(投藥量+PLGA投藥量)]，制備地塞米松微球的優(yōu)化處方為：外水相為2﹪PVA水溶液，有機(jī)相為7.5﹪PLGA濃度，20﹪的投藥比。通過(guò)W/O型乳化-溶劑揮發(fā)法可以簡(jiǎn)便、快速制備得到地塞米松微球，微球形態(tài)完整，表面光滑，微球的粒徑范圍為4.70μm±1.6μm，載藥量為15.49﹪±0.31﹪，包封率為78.64﹪±2.23﹪。體外釋藥10d累積釋放量約90﹪。對(duì)累積釋放曲線分別進(jìn)行零級(jí)(

5、Q=kt)，一級(jí)(Q=100-100ekt)，Higuchi(Q=kt1/2)，Ritger-Peppas(Q=ktm)，擴(kuò)散-松弛(Q=k1t1/2+t)，Hixson-Crowell(Q=kit+k2t2+k3t3)及擴(kuò)散-溶蝕(Q=k1t1/2+k2t+k3t2+k4t3)模型擬合，地塞米松微球釋放曲線的擬合方程為Q=43.9370t1/2+0.7817t-036849t2+0.0206t3，R2=0.998,符合擴(kuò)散-溶蝕釋藥模

6、型。 同樣以PLGA為載體材料，采用O/O型溶劑揮發(fā)法制備5-氟尿嘧啶脫氧核苷PLGA微球(FUR-PLGA-MS)，光學(xué)顯微鏡下觀察微球形態(tài)，紫外分光光度法法測(cè)定微球的載藥量、包封率及累積釋藥量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為制備的微球球形圓整，分散性好。微球平均粒徑為8.52μm,載藥量為7.66﹪±0.06﹪，包封率為75.96﹪±0.80﹪，體外釋放較快，1小時(shí)即釋放了60﹪。從釋放結(jié)果可以推測(cè)，F(xiàn)UR-PLGA-MS是混合骨架結(jié)構(gòu)，部分藥

7、物可能以分子或細(xì)小粒子形式吸附在微球表面。 為研究地塞米松PLGA微球?qū)υ鲋承圆Ａw視網(wǎng)膜病變(PVR)的治療效果，建立了PVR動(dòng)物模型，經(jīng)兔眼角膜緣后2-3mm鞏膜處，用30號(hào)針頭將同源性兔成纖維細(xì)胞注入兔眼玻璃體腔中，造成實(shí)驗(yàn)性PVR動(dòng)物模型。首先進(jìn)行了安全性檢查，通過(guò)分別向兔玻璃體腔內(nèi)注射0.1ml空白微球(10mg)混懸液和0.1ml地塞米松PLGA微球(10mg)混懸液，4周后間接眼底鏡觀察PVR動(dòng)物兔眼眼底兩組均未見(jiàn)

8、異常。在4周后靜脈注氣處死動(dòng)物，光學(xué)顯微鏡組織學(xué)檢查表明兩組也均未見(jiàn)異常。然后進(jìn)行藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)，將12只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分成4組，4只為空白微球陰性對(duì)照組，4只為地塞米松陽(yáng)性對(duì)照組，4只為地塞米松PLGA微球組。在注射同源性兔成纖維細(xì)胞后，立即注入各組藥物混懸液0.1ml。在1、4、7、14、28d用裂隙燈顯微鏡和間接眼底鏡觀察PVR動(dòng)物兔眼眼底，(按Fastenberg的眼底改變分級(jí)方法)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，地塞米松能明顯抑制玻璃體視網(wǎng)膜增生程

9、度，第28d時(shí)空白微球?qū)φ战M平均增生程度為3.8，視網(wǎng)膜脫離的發(fā)生率為87.5﹪，地塞米松陽(yáng)性對(duì)照組為3.0，視網(wǎng)膜脫離的發(fā)生率為62.5﹪，地塞米松微球組為1.9，視網(wǎng)膜脫離的發(fā)生率為25.0﹪。顯示微球組延遲了PVR的發(fā)生，視網(wǎng)膜脫離發(fā)生率明顯減少，且微球組和陽(yáng)性對(duì)照組相比有顯著性差別(P＜0.05)，微球組和空白對(duì)照組比較有顯著差異(P＜0.01)，而空白微球?qū)φ战M和陽(yáng)性對(duì)照組相比沒(méi)有顯著性差別(P＞0.05)。說(shuō)明地塞米松陽(yáng)性對(duì)