兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在殼聚糖支架上培養(yǎng)的體外研究.pdf

1、目的：分離、培養(yǎng)并鑒定兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(rMSCs)，將rMSCs在三維殼聚糖(Chitosan)支架上培養(yǎng)，并在一定條件下誘導(dǎo)其髓核細(xì)胞分化，探討組織工程髓核的可行性。 方法：rMSCs的分離、培養(yǎng)、鑒定；將體外培養(yǎng)傳3代的兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，接種于殼聚糖支架，給予1％ITS-A(主要含有胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白和亞硒酸)誘導(dǎo)其髓核細(xì)胞分化，體外培養(yǎng)7d、14d、21d，并同時(shí)設(shè)立非誘導(dǎo)對(duì)照組。觀察三維支架上rMscs的生長(zhǎng)及誘導(dǎo)情

2、況。對(duì)支架細(xì)胞復(fù)合物行Ⅱ型膠原免疫組化檢測(cè)，并分別測(cè)定培養(yǎng)液中糖胺聚糖(GAG)含量、Ⅱ型膠原的表達(dá)，MTT法測(cè)定細(xì)胞活力。 結(jié)果：應(yīng)用梯度離心法和體外貼壁培養(yǎng)法，可有效分離rMSCs，本實(shí)驗(yàn)也證明rMSCs具有向成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、軟骨細(xì)胞三向分化的潛能。rMSCs在殼聚糖三維支架上可以生長(zhǎng)，培養(yǎng)液中GAG含量、Ⅱ型膠原蛋白表達(dá)等顯示rMSCs可向髓核細(xì)胞分化。 結(jié)論：三維殼聚糖支架上培養(yǎng)的rMSCs，在一定條件下，可