體外誘導兔骨髓間充質(zhì)干細胞向平滑肌細胞分化的研究.pdf

1、目的: 探討在體外誘導兔骨髓間充質(zhì)干細胞向平滑肌細胞分化的的有效方法，以便為后續(xù)實驗工作提供穩(wěn)定的種子細胞來源。 方法: 以密度梯度離心法白兔骨髓液獲取骨髓間充質(zhì)千細胞進行原代及傳代培養(yǎng)，觀察其形態(tài)學變化并鑒定。以5-氮雜胞苷、平滑肌細胞培養(yǎng)上清液誘導及與平滑肌細胞共培養(yǎng)誘導等方法誘導其向平滑肌細胞分化，通過形態(tài)學觀察及免疫組化方法比較各種誘導方法的誘導效率。 結(jié)果: 原代培養(yǎng)的兔骨髓間充質(zhì)干細胞形態(tài)較為均一，呈成纖維細

2、胞樣，生長增殖迅速，傳代培養(yǎng)生長良好。培養(yǎng)的細胞經(jīng)流式細胞儀鑒定，CD34及CD45表達很弱、而CD90強表達，證明所培養(yǎng)的細胞為較純的骨髓間充質(zhì)干細胞。在各組誘導實驗中，以5-氮雜胞苷誘導及共培養(yǎng)誘導聯(lián)合處理組誘導組效率最高，單純共培養(yǎng)誘導組與5-氮雜胞苷誘導及上清液誘導聯(lián)合處理組次之，二組誘導率無顯著差異，單純以上清液誘導組效率最低。 結(jié)論: 密度梯度離心結(jié)合貼壁篩選能獲得較純的骨髓間充質(zhì)干細胞。5-氮雜胞苷及共培養(yǎng)誘導聯(lián)合