姬松茸綜合利用關鍵技術研究與應用.pdf

1、姬松茸是重要的食藥用菌，含有豐富的蛋白質(zhì)、多糖、多不飽和脂肪酸及膳食纖維，具有抑制腫瘤、降血糖、減少低密度膽固醇沉積、提高機體免疫力等功能。長期以來，對姬松茸的深加工主要是提取姬松茸多糖，而提取多糖后的姬松茸蛋白、姬松茸膳食纖維等副產(chǎn)物未得到充分利用，造成大量優(yōu)質(zhì)蛋白、膳食纖維的損失和浪費。另外，食用菌功能性油脂的研究和開發(fā)更未見報道。姬松茸資源利用率低，加工深度不夠，缺乏高科技含量、高附加值及市場潛力大的新型產(chǎn)品。本研究在對國內(nèi)外食用

2、菌深加工現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢進行研究的基礎上，充分考慮原料的綜合利用及加工過程對環(huán)境的影響，對姬松茸中特異性成分提取關鍵技術、功能因子制取關鍵技術及各種功能因子的功能特性與應用進行了深入的研究，實現(xiàn)原料全利用，符合國家倡導的資源節(jié)約型及環(huán)境友好型生產(chǎn)模式，可為姬松茸乃至其他食用菌的綜合利用與精深加工提供理論依據(jù)及實踐性的參考與借鑒。 主要研究內(nèi)容及結果如下： 1.超臨界CO2流體選擇性萃取分離技術提取姬松茸ω-6多不飽和脂肪酸

3、。經(jīng)正交試驗分析確定最佳工藝條件為萃取壓力25MPa，溫度50℃，時間60min，CO2流量25L·h·-1。萃取量為4.03g·(100g)-1，萃取后姬松茸含脂率0.01％。為姬松茸多糖的提取及姬松茸蛋白肽等功能因子的提取或制取提供良好的前提條件。 2.姬松茸超臨界CO2流體萃取物的脂肪酸組成特征為ω-6多不飽和脂肪酸型，亞油酸含量為52.4％，γ-亞麻酸21.12％，油酸12.89％，軟脂酸7.98％，硬脂酸未檢出，ω-6

4、多不飽和脂肪酸總量為73.52％，可作為保健食品姬松茸ω-6多不飽和脂肪酸(Agaricus blazei Murrillω-6 polyunsaturated fatty acid，ω-6APFA)的加工原料。 3.大鼠60只，隨機分為空白對照組、模型組、天然大豆磷脂膠囊(NSPC)0.70 g·kg-1劑量組和ω-6APFA0.28、0.14、0.07 g·kg-13個劑量組(n=10)。試驗結果表明ω-6APFA對高血脂鼠

5、有明顯降血脂作用。 4.60只大鼠隨機分為空白對照組(n=12)、天然大豆磷脂膠囊(NSPC)0.70 g·kg-1·d-1劑量組(n=12)和ω-6APFA0.07、0.14、0.28g·kg-1·d-13個劑量(n=12)組。試驗結果表明ω-6APFA有很好的抑制血栓形成及活血化瘀作用。 5.采用超臨界萃取脫脂處理的姬松茸為原料，采用微波萃取技術提取姬松茸多糖，大幅度縮短萃取時間，降低液固比，減少后續(xù)濃縮工藝能耗。微

6、波萃取姬松茸活性多糖時微波萃取功率影響最大，其次是微波萃取時間，然后是物料粒度，固液比影響最小，最佳工藝條件為微波萃取功率600W，微波萃取時間6min.固液比1：10，物料粒度0.147mm。按此工藝進行萃取，姬松茸多糖提取率高達14.2％。與有關報道相比多糖得率提高29.68％，用水量為其1/3～1/2，浸提時間為其1/30，實現(xiàn)節(jié)水省時降耗。 6.用D315樹脂脫蛋白純化姬松茸粗多糖效果理想，控制流出速度0.5mL·min

7、-1，蛋白脫除率達79.26％，多糖回收率達86.3％。 7.采用葡聚糖凝膠G75柱層析對脫蛋白的姬松茸多糖進一步純化、分離，控制流速0.3mL·min-1，得到分子量10萬左右的β-葡聚糖，純度為85％，此分子量范圍的多糖生物活性較高。 8.考察AL蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、FW蛋白酶四種酶制劑對姬松茸蛋白的水解情況，根據(jù)對蛋白水解能力及酶解液分子量分布確定使用AL蛋白酶和FW蛋白酶對原料進行水解制取低聚肽。

8、 9.利用AL蛋白酶和FW蛋白酶對姬松茸蛋白進行分步水解，AL蛋白酶最佳酶解條件為pH8.5，溫度55℃，酶與底物比2％，底物濃度5％，水解時間2h，肽得率74.7％。以AL蛋白酶酶解產(chǎn)物為反應底物加入FW蛋白酶進行第2次酶解，最佳條件為pH值7.0，溫度50℃，酶與底物比4％，水解時間1.5h，肽得率80.6％。 10.檢測結果表明姬松茸低聚肽粉中肽含量為94.2％，總糖0.1％，脂肪未檢出，水分5.2％，灰分0.5％。姬松

9、茸低聚肽富含脯氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸，必需氨基酸含量高達50.91％。 11.通過Sephadex G-25凝膠色譜分離，酶解物被分成3個組分，分子量集中在5600Da以下。 12.功能試驗結果表明姬松茸低聚肽能明顯降低高血脂模型動物血清T-CHO和TG含量，對高血脂模型大鼠血清中HDL-C含量降低有明顯的抑制作用；對高血脂模型大鼠血清中LDL-C含量升高有明顯的降低作用；并能明顯的提高動物肝臟SOD水平，降低肝臟MDA

10、含量。姬松茸低聚肽對高脂飲食所致小鼠血脂升高和DL-E所致肝脂肪蓄積有明顯的改善作用；姬松茸低聚肽能明顯增加小鼠脾、胸腺臟器系數(shù)，增加小鼠單核巨噬細胞系統(tǒng)吞噬功能，延長小鼠在水中的存活時間。說明姬松茸低聚肽具有降脂、保肝、提高免疫力及抗疲勞作用。 13.以脫脂、提多糖、制取低聚肽之后剩余的姬松茸殘渣為原料，制取高品質(zhì)食用菌膳食纖維，提高姬松茸原料的綜合利用價值。采用高溫高壓擠出技術對原料進行處理，改善物料的理化特性，最佳處理條件

11、為物料含水量80％、擠出溫度145℃、進料速度20Kg·h-1，螺桿轉(zhuǎn)速220r·min-1。未進行擠出改性處理的普通姬松茸纖維(ADF)的可溶性膳食纖維(SDF)含量為2.4％，膨脹力為4.0mL·g-1，持水力為3.1 g·g-1，結合水力為2.7g·g-1；擠出處理后SDF含量為15.1％，膨脹力為18.3mL·g-1，持水力為9.4g·g-1，結合水力為6.4g·g-1，成為品質(zhì)優(yōu)良的高品質(zhì)膳食纖維(HQADF)。 14

12、.采用正常小鼠和燥結型便秘小鼠模型，灌服給藥，并監(jiān)測HQADF對正常小鼠胃小腸運動功能的推進作用，及對正常和燥結型便秘小鼠的排便量及排便時間的影響。結果：HQADF3.50、1.75g·kg-1劑量組對正常小鼠的胃腸運動功能都有明顯的促進作用，推進率分別提高17.80％、16.85％；3.50、1.75g·kg-1bw劑量組都能明顯增加正常小鼠的排便量，縮短小鼠的排黑便時間，排便量分別增加54.32％、32.28％，排黑便時間分別縮短2

13、6.87％、19.70％；能明顯增加燥結型便秘小鼠的排便量，以3.50g·kg-1bw劑量組效果最好，口服4h內(nèi)排便量增加73.44％。試驗結果表明HQADF具有明顯的抗便秘作用。 15.小鼠50只隨機分為空白對照組、四氧嘧啶模型組和HQADF3.50、1.75、0.88g·kg-1體重3個劑量組。實驗結果：HQADF3.50g·kg-1體重對四氧嘧啶糖尿病小鼠(模型鼠)血糖升高有明顯的抑制作用(P<0.05)；對四氧嘧啶糖尿病

14、小鼠(模型組)肝糖元含量有明顯的降低作用(P<0.05)，且3.50 g·kg-1體重優(yōu)于1.75 g·kg-1體重。3.50、1.75、0.88g·kg-1體重劑量組對腎上腺素小鼠血糖(模型組)升高均有明顯的抑制作用(P<0.001、P<0.01和P<0.05)；對腎上腺素造成小鼠(模型組)肝糖元降低有明顯的升高作用，且3.50g·kg-1體重優(yōu)于1.75g·kg-1體重。試驗結果表明HQADF對四氧嘧啶致糖尿病小鼠及腎上腺素血糖升高

15、小鼠具有明顯的降血糖作用。 16.取80只小鼠，雌雄各半，隨機分為5組。試驗結果表明：HQADF能明顯降低肥胖小鼠體重、脂肪指數(shù)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、血糖(GLU)含量，對肥胖小鼠血清中高密度脂蛋白(HDL-C)有明顯的升高作用，證明HQADF具有明顯減肥降脂作用。 17.姬松茸膳食纖維(ADF)用于面包生產(chǎn)時必需經(jīng)過適當方法處理才能改善面包品質(zhì)。超臨界流體萃取純化處理、微波萃