牡丹組織培養(yǎng)技術(shù)的初步研究.pdf

1、本文以牡丹不同品種的鱗芽和帶有腋芽的莖段為外植體，探討了不同的消毒方式及消毒時(shí)間對(duì)外植體消毒的影響；研究不同的基本培養(yǎng)基、不同的植物生長(zhǎng)調(diào)劑物質(zhì)、不同的附加物質(zhì)和不同的環(huán)境因子在腋芽的誘導(dǎo)、增殖以及壯苗生長(zhǎng)過(guò)程中的作用，分析了不同培養(yǎng)過(guò)程中主要影響因子及其有效濃度使用范圍；同時(shí)以健壯的無(wú)菌試管苗為材料，探討了愈傷組織誘導(dǎo)和增殖過(guò)程中主要的影響因子及其有效的濃度范圍；同時(shí)又以花藥為外植體，探討了愈傷組織誘導(dǎo)過(guò)程中主要的影響因子及其有效的濃

2、度范圍。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： 1、在外植體的消毒試驗(yàn)中，以0.1％HgCl2為消毒劑進(jìn)行消毒處理，結(jié)果表明：牡丹鱗芽適合的消毒方式為二次消毒，適合的時(shí)間為6min/6min，帶有腋芽的莖段消毒時(shí)間較鱗芽短，時(shí)間以6min為宜。 2、以‘烏龍捧盛，、‘洛陽(yáng)紅’、‘魯荷紅’、‘肉芙蓉’和‘趙粉’5個(gè)牡丹品種的鱗芽為外植體進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，結(jié)果表明：品種以‘烏龍捧盛’和‘魯荷紅’表現(xiàn)較好，采集時(shí)間以1～2月份為宜，其誘導(dǎo)率分別為88％和

3、82％。 3、以‘烏龍捧盛，和‘魯荷紅’為材料進(jìn)行增殖培養(yǎng)，結(jié)果表明：2品種的無(wú)菌試管苗在增殖過(guò)程中，適宜的基本培養(yǎng)基為改良MS，適宜的細(xì)胞分裂素為T(mén)DZ，濃度以0.1mg·L-1時(shí)效果較好；繼代3次時(shí)2個(gè)品種無(wú)菌試管苗增殖系數(shù)最高，分別為5.2和5.3；光質(zhì)比例可調(diào)節(jié)的LED光源對(duì)牡丹無(wú)菌試管苗的增殖和生長(zhǎng)狀況均無(wú)明顯的促進(jìn)作用；普通熒光燈，當(dāng)光照強(qiáng)度為30001x時(shí)，能明顯的促進(jìn)試管苗的生長(zhǎng)，出現(xiàn)黃化現(xiàn)象的葉片較少，葉片顏色

4、較低光強(qiáng)下深，植株較低光強(qiáng)下高、健壯；CO2施肥和不同濃度的蔗糖對(duì)牡丹無(wú)菌試管苗的增殖無(wú)促進(jìn)作用，但當(dāng)CO2為3000ppm、蔗糖濃度為20g·L-1時(shí)，試管苗的生長(zhǎng)狀況良好，新出葉片顏色濃綠，植株較高，只有外圍葉片出現(xiàn)黃化。 4、以‘烏龍捧盛，和‘魯荷紅’為材料進(jìn)行壯苗培養(yǎng)，試驗(yàn)結(jié)果表明：水解乳蛋白、酪蛋白和亞精胺對(duì)這2個(gè)品種無(wú)菌試管苗的生長(zhǎng)無(wú)明顯的促進(jìn)作用，而PP333能夠有效的減少無(wú)菌試管苗生長(zhǎng)過(guò)程中黃葉的出現(xiàn)，濃度以1.

5、0mg·L-1效果較好，但植株較矮，植株呈現(xiàn)深綠色。 5、以‘烏龍捧盛，的無(wú)菌試管苗為材料進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)，試驗(yàn)結(jié)果表明：薄細(xì)胞層的厚度對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)影響最大，最佳培養(yǎng)基為：MS+6-BA3.0mg·L-1+NAA0.05mg·L-1+TDZ0·05mg·L-1+2,4-D5.0mg·L-1+AgNO30.2mg·L-1，片層厚度為0.5～0.8mm效果最佳。 6、在愈傷組織的繼代培養(yǎng)中，試驗(yàn)結(jié)果表明：活性炭能有效的抑止

6、褐化現(xiàn)象的產(chǎn)生，用量為0.1％效果較好，蔗糖和多胺對(duì)愈傷組織的生長(zhǎng)沒(méi)有明顯的促進(jìn)作用，隨著蔗糖和多胺濃度的增加，愈傷組織出現(xiàn)自然死亡現(xiàn)象。 7、以‘洛陽(yáng)紅，的花藥為外植體進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)，試驗(yàn)結(jié)果表明：花藥誘導(dǎo)愈傷組織誘導(dǎo)的最佳培養(yǎng)基為：MS+6-BA0.5mg·L+NAA3.0mg·L-1+2,4-D1.0mg·L-1+TDZ0.05mg·L-1，消毒時(shí)間以3min為宜。 8、以‘烏龍捧盛’的無(wú)菌試管苗為材料進(jìn)行生根培