BCL-2基因?qū)δX缺血神經(jīng)元調(diào)亡時(shí)亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的影響.pdf

1、目的:通過體外培養(yǎng)SD乳鼠皮層神經(jīng)元，制作神經(jīng)元缺血再灌注模型，將Bcl-2基因轉(zhuǎn)染于神經(jīng)元內(nèi)，探討B(tài)cl-2基因影響神經(jīng)元凋亡的亞細(xì)胞機(jī)制。
　　 方法:體外培養(yǎng)SD乳鼠皮層神經(jīng)元，免疫熒光染色、免疫組織化學(xué)鑒定神經(jīng)元純度;將培養(yǎng)出來(lái)的SD乳鼠皮層神經(jīng)元用氧糖剝奪法制作缺血再灌注模型;將Bcl-2基因轉(zhuǎn)染于神經(jīng)元內(nèi)，利用流式細(xì)胞術(shù)AnnexinV、PI雙標(biāo)檢測(cè)細(xì)胞活性及凋亡率;Western-blot免疫印跡分析Caspase

2、-12、GRP78、Cytc及Bcl-2的蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果:皮層神經(jīng)元可體外培養(yǎng)，皮層神經(jīng)元體外模擬缺血再灌注（缺血6h再灌注24h），缺血再灌注組細(xì)胞凋亡明顯高于對(duì)照組，Cytc、GRP78、Caspase-12蛋白水平明顯高于對(duì)照組(P＜0.05);將Bcl-2基因過表達(dá)于神經(jīng)元內(nèi)，神經(jīng)元缺血6h再灌注24h細(xì)胞凋亡率為16.98±1.22％，Bcl-2質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后降至8.54±1.12％，轉(zhuǎn)染Bcl-2基因組CytC、