蒙古口蘑分子鑒定及其菌絲體液體發(fā)酵技術(shù)與應(yīng)用.pdf

1、蒙古口蘑(Tricholoma mongolicum Imai)主要分布在蒙古高原草原區(qū)，為中外馳名的野生食用菌，近幾十年來(lái)逐步瀕臨滅絕，且人工栽培尚未獲得實(shí)質(zhì)性的突破，亟待對(duì)其基因資源、發(fā)酵生產(chǎn)技術(shù)及其產(chǎn)物營(yíng)養(yǎng)價(jià)值開(kāi)展研究。
　　本論文應(yīng)用簡(jiǎn)單重復(fù)序列間區(qū)(ISSR)技術(shù)對(duì)含蒙古口蘑在內(nèi)的16個(gè)菌株進(jìn)行了分子鑒別;同時(shí)，采用單因素及正交試驗(yàn)研究了蒙古口蘑菌絲體液體發(fā)酵工藝和菌絲體制成口蘑醬的配方;采用響應(yīng)曲面法優(yōu)化了菌絲體胞內(nèi)多

2、糖的提取工藝，分析了胞內(nèi)多糖對(duì)嗜酸乳桿菌的促生長(zhǎng)作用，探討了蒙古口蘑多糖作為益生元的可能性。主要研究結(jié)果如下:
　　1.從12條已知的微衛(wèi)星序列引物中篩選出2個(gè)適用于蒙古口蘑鑒定的引物，建立了用于蒙古口蘑鑒定的ISSR方法。
　　2.以蒙古口蘑胞內(nèi)多糖和胞外多糖為目標(biāo)產(chǎn)物，采用單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)，確定蒙古口蘑菌株搖瓶發(fā)酵最佳培養(yǎng)工藝條件為:酵母膏2％、KH2PO40.3％、葡萄糖3％、MgSO40.3％，接種量12％、溫度

3、25℃、pH6.5左右、轉(zhuǎn)速150 r/min。在此條件下，胞內(nèi)多糖產(chǎn)量可達(dá)1.180g/L，胞外多糖產(chǎn)量可達(dá)1.078 g/L。
　　3.采用響應(yīng)面法對(duì)口蘑菌絲體胞內(nèi)多糖的提取工藝進(jìn)行研究，獲得菌絲體多糖最佳熱水浸提的工藝條件為:浸提溫度為85℃、浸提時(shí)間2.2h、料液比為1∶32 g/mL，此時(shí)多糖得率為7.36％。在此基礎(chǔ)上，進(jìn)行超聲波輔助熱水浸提胞內(nèi)多糖工藝研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，多糖得率可達(dá)12.92％以上。
　　4.將上

4、述口蘑胞內(nèi)多糖與傳統(tǒng)益生元菊粉進(jìn)行比較，檢測(cè)其對(duì)益生菌發(fā)酵酸乳的影響。發(fā)現(xiàn)口蘑多糖濃度為0.6％、菊粉濃度為3％時(shí)，發(fā)酵乳樣品中嗜酸乳桿菌的活菌數(shù)和黏度達(dá)到最大值，均高于對(duì)照組，菌落數(shù)的對(duì)數(shù)值分別可達(dá)10.02和10.18（菌落總數(shù)分別為1.05×1010 cfu·mL-1和1.51×1010cfu·mL-1）;在pH值測(cè)定實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)口蘑多糖濃度為0.6％和菊粉濃度為3％時(shí)，出現(xiàn)最低pH值（分別為5.02和4.98），研究結(jié)果證實(shí)了胞內(nèi)