胸腺上皮性腫瘤臨床病理分析及相關基因遺傳學研究.pdf

1、目的：本研究旨在研究胸腺上皮性腫瘤的WHO 新分類、臨床病理特點及相關基因遺傳學改變，并進一步探討該腫瘤各組織學亞型的生物學特征，為廓清胸腺上皮性腫瘤的分類提供依據(jù)。本研究包括：1）通過對胸腺上皮性腫瘤的形態(tài)學特征和免疫表型進行回顧性復習，按照2004年WHO 胸腺腫瘤分類標準進行組織學分型，并對臨床資料加以總結(jié)和分析，探討胸腺上皮性腫瘤的臨床病理學特點，評價2004年WHO 胸腺腫瘤分類的可重復性及其臨床意義；2）應用熒光原位雜交技術

2、（間期FISH）檢測前期研究中的B3 型胸腺瘤、胸腺癌、其他亞型胸腺瘤及正常胸腺組織1 號染色體擴增情況，研究胸腺上皮性腫瘤與正常胸腺組織之間、胸腺上皮性腫瘤瘤各亞型之間是否具有不同的遺傳學特點；3）通過免疫組織化學方法對前期研究病例進行c-Jun、p73、CASP9、N-ras 等位于1 號染色體的腫瘤相關基因及生物靶向治療相關基因EGFR的異常表達進行研究，進一步探討1 號染色體及其基因在胸腺上皮性腫瘤的發(fā)生發(fā)展及生物學行為中所起的

3、作用及其發(fā)揮作用的機制，為科學判斷各型胸腺瘤預后、制定個體化治療方案提供更多詳實的理論依據(jù)。
　　 方法：課題第一部分：總結(jié)新疆醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院病理科2001年1 月~2010年2 月間診斷的所有胸腺上皮性腫瘤（64例），按照2004年WHO 胸腺腫瘤分類進行組織學分型，并對臨床、影像和預后資料加以總結(jié)和分析。課題第二部分：應用熒光原位雜交技術（間期FISH，1 號染色體著絲粒探針）檢測11例正常胸腺組織和前期研究手術切除標

4、本中的B3 型胸腺瘤（11例）、胸腺癌（8例）、A 型（2例）、AB 型（19例）、B1 型（4例）和B2 型（14例）胸腺瘤1 號染色體擴增情況。課題第三部分：通過免疫組織化學方法（Envision 二步法）對前期研究中的胸腺上皮性腫瘤病例及正常對照組織進行1 號染色體熱點基因c-Jun、p73、CASP9、N-ras 及生物靶向治療相關基因EGFR的異常表達進行檢測。
　　 結(jié)果：
　　 課題第一部分：胸腺瘤55例，

5、胸腺癌9例。胸腺瘤中以AB 型最多見，占（34.5%）（19/55），其次為B2 型，占27.3%（15/55），B3 型，占21.8%（12/55）；B1 型和A 型相對少見，分別占7.27%（4/55）和5.4%（3/55）；另有2例化生性胸腺瘤（3.6%）。9例胸腺癌中8例為鱗狀細胞癌分化，1例為神經(jīng)內(nèi)分泌癌。臨床上，多數(shù)患者因咳嗽或胸痛就診，部分病例為體檢中偶然發(fā)現(xiàn)。胸腺瘤中17例伴有重癥肌無力（30.9%）。影像學上，61例（

6、95.3%）位于前縱隔，其中A、AB、B1和多數(shù)B2 型胸腺瘤表現(xiàn)為邊緣光整、密度均勻的腫塊，少數(shù)B2 型、多數(shù)B3 型胸腺瘤和胸腺癌表現(xiàn)為邊界欠清、外形不規(guī)則和密度不均的腫塊。Masaoka分期為：I 期19例（32.7%），II 期20例（34.3%），III 期15例（25.8%），IV 期4例（6.8%）。分析顯示，組織學分型與臨床分期呈正相關關系，具有統(tǒng)計學意義（相關系數(shù)r=0.566，P=0.000）。
　　 課題第

7、二部分：60例胸腺上皮性腫瘤中合計19例顯示1 號染色體獲得，占31.7%，11例正常胸腺對照組織均未顯示1 號染色體獲得，經(jīng)統(tǒng)計學檢驗提示胸腺上皮性腫瘤發(fā)生1 號染色體獲得的陽性率顯著高于其在非瘤胸腺組織的陽性率（P＜0.05）。同時，本研究還顯示1 號染色體獲得在不同亞型之間存在統(tǒng)計學差異（P＜0.05），其中胸腺癌陽性率最高，占75.0%（6/8），B3 型次之，占54.5%（6/11），B1 型最少，4例均為陰性。進一步行四格表

8、卡方檢驗，其結(jié)果顯示B3 型胸腺瘤陽性率顯著高于其他亞型胸腺瘤（P＜0.05），B3 型胸腺瘤與胸腺癌的陽性率之間無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。對1 號染色體獲得在胸腺上皮性腫瘤不同臨床分期進行統(tǒng)計學分析，結(jié)果提示不同臨床分期間1 號染色體獲得差異有統(tǒng)計學意義（x2=9.007，P=0.023）。進一步經(jīng)組間比較發(fā)現(xiàn)，III 期及以上1號染色體獲得陽性率明顯高于I 期和II 期（x2=8.839，P=0.003）。I 期和II 期1 號

9、染色體獲得陽性檢出差異沒有統(tǒng)計學意義（x2=0.101，P=0.750）。
　　 課題第三部分：1）60例胸腺上皮性腫瘤中合計22例存在c-Jun陽性表達，占36.7%，11例正常對照組織均未顯示c-Jun 異常表達，對胸腺上皮性腫瘤及正常對照組織c-Jun陽性表達進行Fisher's Exact Test檢驗，P＜0.05，表明胸腺上皮性腫瘤發(fā)生c-Jun 異常表達的陽性率顯著高于其在正常對照組織的陽性率。C-Jun陽性表達在

10、各型之間亦存在統(tǒng)計學差異（P＜0.05），其中胸腺癌陽性率最高，占87.5%（7/8），B3 型次之，占45.5%（5/11），A 型、B1 型和化生性胸腺瘤均為陰性。C-Jun 在胸腺上皮性腫瘤不同臨床分期的表達存在統(tǒng)計學差異（P＜0.05），IV 期最高，達100％，其次為III 期，為53.3％。2）60例胸腺上皮性腫瘤中合計12例存在N-ras陽性表達，占20.0%，11例正常對照組織3例存在N-ras陽性表達，占27.3％，對

11、胸腺上皮性腫瘤及正常對照組織N-ras陽性表達進行校正卡方檢驗，P＞0.05，表明N-ras 異常表達的陽性率在兩者之間無顯著性差異。N-ras陽性表達在胸腺上皮性腫瘤各亞型之間亦無統(tǒng)計學差異。其中A 型陽性率最高，占50%（1/2），B3 型次之，占45.4%（5/11），B1 型和化生性胸腺瘤均為陰性。N-ras 在胸腺上皮性腫瘤不同臨床分期的表達無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。3）60例胸腺上皮性腫瘤中合計30例顯示Caspase9

12、陽性表達，占50.0%，其陽性表達略低于在胸腺正常組織中的表達（7/11，63.6％），但未呈現(xiàn)統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。Caspase9陽性表達在各亞型胸腺上皮性腫瘤之間存在統(tǒng)計學差異（P＜0.05）。其中2例A 型及2例化生型胸腺瘤均不同程度顯示陽性表達，4例B1 型均為陰性。Caspase9 在胸腺上皮性腫瘤不同臨床分期的表達無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。4）60例胸腺上皮性腫瘤中合計28例顯示p73陽性表達，占46.6%，其陽

13、性表達顯著高于在正常胸腺組織中的表達（1/11，9.1%）（P＜0.05）。
　　 P73陽性表達在各亞型之間存在統(tǒng)計學差異（P＜0.05），進一步對B3 型胸腺瘤與非B3 型胸腺瘤，B3 型胸腺瘤及胸腺癌中p73陽性表達分別進行四格表卡方檢驗，其結(jié)果顯示B3 型陽性率顯著高于其他亞型胸腺瘤（P＜0.05），而B3 型胸腺瘤與胸腺癌的陽性率之間無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。P73陽性表達在胸腺上皮性腫瘤不同臨床分期的表達無統(tǒng)計學

14、差異（P＞0.05）。5）60例胸腺上皮性腫瘤中合計46例存在EGFR陽性表達，占76.7%，顯著高于其在胸腺正常組織中的陽性表達（1/11，9.1%）（P＜0.05）。EGFR陽性表達在各亞型胸腺上皮性腫瘤之間存在統(tǒng)計學差異，其中胸腺癌陽性率最高，占100%（8/8），B3 型次之，占90.9%（10/11），A 型和化生性胸腺瘤均為陰性。EGFR陽性表達在胸腺上皮性腫瘤不同臨床分期的表達無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。
　　

15、結(jié)論：1）基于細胞形態(tài)、功能和遺傳學的2004年WHO胸腺腫瘤分類標準具有較高的可重復性，并在一定程度上反應胸腺瘤各亞型的生物學行為，對臨床治療和預后判斷有指導意義；2）胸腺上皮性腫瘤發(fā)生1 號染色體獲得的陽性率顯著高于其在正常胸腺組織的陽性率，表明1 號染色體獲得在胸腺上皮性腫瘤的遺傳學上起著重要作用；B3 型及胸腺癌的1 號染色體獲得高于其他組織學亞型，提示B3 型胸腺瘤及胸腺癌與染色體失衡關系密切，B3 型胸腺瘤具有與其他亞型胸腺

16、瘤不同的遺傳學特點；3）c-Jun、p73、CASP9、N-ras 等位于1 號染色體的腫瘤相關基因及生物靶向治療相關基因EGFR的異常表達均與胸腺上皮性腫瘤的發(fā)生發(fā)展及生物學行為相關，其中c-Jun、p73 及EGFR 在胸腺上皮性腫瘤的陽性表達顯著高于其在正常胸腺組織中的表達，這三者在B3 型胸腺瘤中的陽性率與其在胸腺癌中的陽性率相似，高于其他亞型。Caspase9 在B 型胸腺瘤和胸腺癌中的表達較A 型胸腺瘤低，提示存在Caspa