BIGH3基因相關(guān)性角膜營養(yǎng)不良的臨床及遺傳學(xué)分析.pdf

1、角膜營養(yǎng)不良是臨床上一系列較常見的與基因遺傳相關(guān)的原發(fā)性、進(jìn)行性、致盲性角膜病變的總稱,發(fā)病率約為0.3/萬.其病理形態(tài)組織學(xué)特征為雙眼角膜異常物質(zhì)沉積,典型臨床表現(xiàn)為雙眼角膜出現(xiàn)特征明顯且進(jìn)展性混濁以及視力下降.目前除對癥治療外,角膜移植術(shù)是其主要治療方法,但術(shù)后有一定的復(fù)發(fā)率. 目前,遺傳因素被公認(rèn)為角膜營養(yǎng)不良的主要病因,也是近年來研究的熱點(diǎn).隨著分子遺傳學(xué)的發(fā)展,越來越多的角膜營養(yǎng)不良致病基因被定位和相應(yīng)的基因突變位點(diǎn)被

2、發(fā)現(xiàn).BIGH3基因是1997年由Munier等人確定的第一個(gè)角膜營養(yǎng)不良的致病基因,隨后該基因被正式命名為TGFB I (transforming growth factor,beta-induced 0MIM ＃ 601692),定位于5q31.1,有17個(gè)外顯子,其中4、11、12、14號(hào)外顯子為其基因突變熱點(diǎn).臨床上以BIGH3基因相關(guān)性角膜營養(yǎng)不良最為常見,包括有顆粒狀角膜營養(yǎng)不良I型(Granular corileal dy

3、strophy I,CDGGⅠ)、顆粒狀角膜營養(yǎng)不良Ⅱ型(Avellino corrleal dystrophy,CDGG Ⅱ/ACD)、格子狀角膜營養(yǎng)不良Ⅰ、ⅢA型(Lattice corneal dystroptly Ⅰ、ⅢA,CDLⅠ、CDL ⅢA)等.臨床上,BIGH3基因相關(guān)性角膜營養(yǎng)不良表型各異,具有一定的遺傳異質(zhì)性,即同一基因突變可引起不同的臨床表現(xiàn),而相同或相似的臨床表現(xiàn)可源于不同的致病基因(位點(diǎn)).遺傳學(xué)上,目前為止已

4、發(fā)現(xiàn)的家系病例都表現(xiàn)為單基因常染色體顯性遺傳,患者后代的發(fā)病率為50﹪左右,具有較高的遺傳性和外顯率.本實(shí)驗(yàn)將研究我國人群中上述四型常見BIGH3基因相關(guān)性角膜營養(yǎng)不良的臨床表現(xiàn)、遺傳學(xué)特點(diǎn)和基因突變等問題. 目的： 1、通過對BIGH3基因相關(guān)性角膜營養(yǎng)不良家系病例5例,散發(fā)病例10例進(jìn)行臨床檢查和遺傳學(xué)系譜調(diào)查分析,了解該病的臨床特點(diǎn)和遺傳學(xué)特征. 2、了解該病的分子遺傳學(xué)基礎(chǔ)并通過分子遺傳學(xué)檢測,分析不同類

5、型的BIGH3基因相關(guān)性角膜營養(yǎng)不良的基因突變特點(diǎn). 方法： 1、詢問患者及其家系成員的病史并進(jìn)行視力、裂隙燈顯微鏡、熒光素染色等眼科常規(guī)檢查及眼前段攝像,分析其臨床發(fā)病特點(diǎn)并明確其臨床診斷; 2、通過詢問個(gè)人史、家族史并繪制相關(guān)系譜圖,了解BIGH3基因相關(guān)性角膜營養(yǎng)不良在家系中的發(fā)病情況; 3、對確診為CDGG Ⅰ、Ⅱ型,LCD Ⅰ、ⅢA型的患者和對照組各抽取5ML血,提取DNA后,進(jìn)行基因突變檢測.

6、 結(jié)果： 1、臨床診斷為CDGG Ⅰ、Ⅱ型及LCD Ⅰ、ⅢA型在發(fā)病年齡、受累程度、進(jìn)展情況和預(yù)后等各臨床表現(xiàn)均不同; 2、在有明確家族史的家系1、2、6、8、12中均表現(xiàn)為垂直傳遞且家系2中代代之間發(fā)病率差異無顯著性,男女均發(fā)病; 3、CDGG Ⅰ類型中12號(hào)外顯子存在R555W、A546D、1665-1666insC突變,而CDGG Ⅱ類型中4號(hào)外顯子存在R124H突變; 4、LCD Ⅰ類型中

7、4號(hào)外顯子存在R124C、12號(hào)外顯子存在T538P突變,而LCDⅢA類型中12號(hào)外顯子存在A546T、11號(hào)外顯子存在P501T突變; 5、分別在BIGH3基因的8號(hào)、11號(hào)、12號(hào)外顯子上存在V327V、L472L、F540F三種多態(tài)類型. 結(jié)論： 1、BIGH3基因相關(guān)性角膜營養(yǎng)不良各型臨床表現(xiàn)和基因突變位點(diǎn)均不同,存在明顯等位基因間的遺傳異質(zhì)性;2、所研究家系病例進(jìn)一步證實(shí)了BIGH3基因相關(guān)性角膜營養(yǎng)不

8、良的遺傳方式為單基因常染色體顯性遺傳; 3、CDGG I患者R555W、A546D突變,ACD患者R124H突變,LCD I患者R124C、T538F'突變,LCDIIIA患者A546T、P50lT突變,國內(nèi)外均有相關(guān)報(bào)道;CDGG I患者1665-1666insC突變尚未見報(bào)道; 4、突變檢測證實(shí)了BIGH3表達(dá)蛋白(KE蛋白)的氨基酸R124和facs-4區(qū)域是突變影響的主要區(qū)域,也是我們進(jìn)一步研究該病發(fā)病機(jī)制的突破