貴陽及其周邊地區(qū)動(dòng)物弓形蟲感染的初步調(diào)查及弓形蟲地理株的分離與基因型鑒定.pdf

1、目的：
　　以貴陽及其周邊地區(qū)貓、豬和狗等動(dòng)物弓形蟲感染的流行病學(xué)調(diào)查為基礎(chǔ)，分離弓形蟲蟲株,鑒定該地理區(qū)域內(nèi)弓形蟲的基因型，為貴州省弓形蟲的防治工作提供依據(jù)。
　　方法：
　　1.采集圈養(yǎng)豬、家養(yǎng)狗和流浪貓的外周血或心臟及腦組織樣本。
　　2.采用 ELISA法檢測血漿中的弓形蟲抗原 CAG、抗弓形蟲抗體 IgG、IgM；PCR檢測弓形蟲特異性核酸序列529bp。結(jié)合弓形蟲抗原、抗弓形蟲抗體、弓形蟲DNA檢測，

2、作為判斷弓形蟲感染的依據(jù)。
　　3.選擇經(jīng)確認(rèn)弓形蟲感染的動(dòng)物組織樣本，采用小鼠腹腔接種分離弓形蟲蟲株。
　　4.采用PCR-RFLP（限制性片段長度多態(tài)性）和基因測序技術(shù)分析弓形蟲DNA樣本的SNP(單核苷酸多態(tài)性)，鑒定研究區(qū)域內(nèi)的弓形蟲基因型。
　　結(jié)果：
　　1.采集豬70頭，家養(yǎng)狗107只，流浪貓19只。血清學(xué)檢測發(fā)現(xiàn)，抗弓形蟲IgG抗體陽性率豬為70％，狗為20.56%，貓為63.16%；抗弓形蟲Ig

3、M抗體陽性率豬為0，狗為0.93%，貓為21.05%；弓形蟲循環(huán)抗原（CAG）陽性率豬為16.88%，狗為13.08%，貓為10.53%。PCR擴(kuò)增弓形蟲529bp特異性片段，其陽性率豬為31.51%，狗為3.74%，貓為52.63%。綜合弓形蟲抗原、核酸和抗弓形蟲抗體的檢測結(jié)果，動(dòng)物弓形蟲感染率平均為55.61%，其中豬為80%，家養(yǎng)狗為34.58%，流浪貓為84.21%。
　　2.基于弓形蟲血清學(xué)和核酸檢測結(jié)果，用小鼠腹腔接種

4、法分離出5株弓形蟲貴州地理株，這些弓形蟲株有增殖慢、毒力低、易形成假包囊等生物學(xué)特點(diǎn)。
　　3.多重-巢式多位點(diǎn)PCR-RFLP和基因測序技術(shù)分析源自不同動(dòng)物的36個(gè)弓形蟲 DNA樣本，結(jié)果表明該地區(qū)動(dòng)物感染的弓形蟲具有相同的基因型特征。結(jié)論：
　　1.貴州省圈養(yǎng)豬和流浪貓的弓形蟲感染情況比較嚴(yán)重，家養(yǎng)狗的感染率則相對較低。
　　2.動(dòng)物弓形蟲感染以慢性或隱性感染為主，近期感染或急性感染者少見。
　　3.貴陽及其