A藥固體分散體膠囊的研制.pdf

1、目的：A藥是從土壤中一種鏈霉菌株發(fā)酵產(chǎn)物中分離出來的大環(huán)內(nèi)脂類抗生素，是一種新型的免疫抑制劑。大量動物實驗與臨床應(yīng)用研究發(fā)現(xiàn)，A藥的免疫抑制作用比環(huán)孢霉素A(CsA)高10～100倍，而不良反應(yīng)更少。臨床上廣泛應(yīng)用于器官移植的抗排異反應(yīng)，尤其是肝移植。 然而，A藥在水中幾乎不溶，溶解度為1～2ug/ml，高度依賴膽汁吸收和廣泛的胃腸道代謝使得其口服生物利用度低，狗口服1mg后的最高血．藥濃度僅為0.4ng/ml，限制了其在臨床的

2、廣泛應(yīng)用。木實驗對A藥的理化性質(zhì)進行了研究，將其制成固體分散體，再進一步制成膠囊，提高了A藥在水中的溶解度，從而提高了藥物的溶出度及生物利用度，為廣泛的臨床應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。 方法：A藥固體分散體膠囊的制備：在資料和預(yù)實驗的基礎(chǔ)上，初步確立了A藥固體分散體膠囊的處方和制備工藝的篩選范圍，根據(jù)A藥和輔料的理化性質(zhì)，確定溶劑法為A藥固體分散體膠囊的制備方法。以溶出度和穩(wěn)定性為指標，對五個處方因素、三個工藝因素進行了單因素考察，確定了攪

3、拌速度、干燥溫度、粉碎過篩目數(shù)三個工藝因素的具體條件，然后在單因素考察的基礎(chǔ)上，以藥物與載體的比例、藥物與崩解劑PVPP的比例、藥物與乳糖的比例為考察因素，以溶出度和操作難易程度為指標，設(shè)討三因素三水平的正交實驗，對處方進行優(yōu)化，對評分結(jié)果進行極差分析，確立了A藥固體分散體膠囊的最佳處方。按最優(yōu)制備工藝和處方，制備三批A藥固體分散體膠囊，測定藥物的溶出度，考察制備工藝的穩(wěn)定性。 A藥固體分散體膠囊的檢測方法：在文獻報道和預(yù)實驗基礎(chǔ)上，建

4、立高效液棚分析方法(HPLC)，測定三批A藥固體分散體膠囊的含最和溶出度。色譜條件如下：色譜柱：Hypeysil-ODS C<,18>梓(4.6×250mm，粒徑5μm)，柱溫：60℃，流動相：0.1％磷酸：乙腈(30:70)，流速：1 ml/min，檢測波長：210 nm。 溶出度方法采用中國藥典2005版二部附錄XC(溶出度測定法)第三法(小杯槳法)，轉(zhuǎn)速為100r/min，0.2％的SDS溶液為溶出介質(zhì)，0.5h取樣后H

5、PLC法測定，記錄色譜圖，代入標準曲線計算藥物溶出度。 A藥固體分散體膠囊的穩(wěn)定性實驗：將按最優(yōu)處方和工藝制備的A藥固體分散體膠囊分別進行高溫、高濕、強光條件下的影響因素實驗，考察高溫．(40℃、60℃)、高濕(相對濕度分別為75％飽和NaCl溶液和92.5％的飽和KNO<,3>溶液)和強光(4500Lx)對A藥固體分散體穩(wěn)定性的影響，從而確定膠囊的外包裝材料?？疾炱湓诩铀贄l件(溫度40℃、相對濕度75％放置六個月)及長期條件(

6、室溫放置九個月)的穩(wěn)定性。 A藥固體分散體膠囊的藥物動力學實驗：以家犬為實驗動物，以國外生產(chǎn)的A藥固體分散體膠囊為對照品，采用兩制劑、兩周期雙交義自身對照設(shè)計，對自制的A藥固體分散體膠囊進行藥代動力學研究，并與國外對照品進行了生物等效性評價。采用酶聯(lián)免疫法(enzyme-linked immunosorbantassay，ELISA)測定A藥的血藥濃度，采用3p97程序計算藥物動力學參數(shù)，計算相對生物利用度，經(jīng)方差分析及雙單側(cè)t

7、檢驗評價A藥同體分敞體膠囊與國外對照品的生物等效性。 結(jié)果：A藥固體分散體膠囊的制備：通過單因素考察，確定了處方條什：羥丙甲纖維素(HPMC)為載體，95％乙醇為溶劑，并將A藥與HPMC的用量比例、A藥與PVPP的用量比例、A藥與乳糖的用量比例作為進一步考察的因素;確定了工藝條件：攪拌速度為300 r/min，干燥溫度為40℃，整理過篩木數(shù)為80目。對需進一步考察的處方的三個因素作正交實驗，極差分析結(jié)果顯示：A藥與HPMC的比例

8、影響最大，得到的優(yōu)化處方為：A藥與HPMC的比例為1：2、A藥與PVPP的比例為1：3、A藥與乳糖的比例為1：4。按最優(yōu)處方和工藝制備三批樣品(060301、060302、060303)，0.5h測定溶出度為91.15％，90.00％，90.52％，藥物溶出具有重現(xiàn)性，說明制備工藝穩(wěn)定可控。 A藥固體分散體膠囊制備的方法：將處方量的A藥粉末和處方量的羥丙甲纖維素(HPMC)溶于95％乙醇中，攪拌混勻，按處方量加入變聯(lián)聚維酮(P

9、VPP)和乳糖，室溫一F，不斷攪拌揮發(fā)溶劑至半固體狀態(tài)，40℃真空減壓干燥，干品粉碎過篩(80 H)得固體分散體粉末，測定含量，與填充劑微晶纖維素(PH101)、潤滑劑硬脂酸鎂混合均勻，灌裝于膠囊殼中。 A藥固體分散體膠囊的檢測方法：高效液相法(HPLC)測定含量的標準曲線為: Y=20119793.26x+315141.04r=0.9999，A藥的檢測波長為210nm，方法平均惻收率為99.81％，日內(nèi)精密度為2.0％，1.

10、1％，2.3％，日問精密度為2.2％，1.8％，2.0％，符合中國藥典規(guī)定。按最優(yōu)處方和工藝制備的三批A藥固體分散體膠囊，HPLC測定含量結(jié)果為：三批A藥膠囊的含量分別為標示量的103.4％、102.3％、101.2％，均在限定的90～110％的范圍內(nèi)。 HPLC測定溶出度的標準曲線為：Y=59433X-11324r=0.9998，A藥的檢測波長為210nm，溶出介質(zhì)為0.2％的SDS水溶液，方法平均回收率為100.3％，日內(nèi)精密度為1

11、.5％，1.4％，2.1％，H間精密度為1.8％，1.9％，2.3％，符合中國藥典規(guī)定。自制A藥膠囊(060301)與市售A藥膠囊進行溶出度比較，結(jié)果為：自制A藥膠囊的溶出度為89.30％，市售A藥膠囊的溶出度為88.80％，說明自制A藥固體分散體膠囊與市售A藥膠囊溶出度達到一致。 A藥固體分散體膠囊的穩(wěn)定性實驗：A藥固體分散體膠囊在高溫、高溫條件下,性狀沒有變化，溶出度和含量下降明顯，故A藥固體分散膠囊對高溫、高濕均比較敏感

12、，需防潮的包裝材料。在強光照射條件下，性狀、含量及溶出度均無顯著性差異，表明A藥固體分散體膠囊對光穩(wěn)定。加速實驗在放置一個月、二個月、三個月、六個月及長期實驗在放置三個月、六個月和九個月后取樣做檢測，各指標無顯著變化，表明A藥同體分散體膠囊在加速實驗六個月和長期實驗九個月的實驗條件下穩(wěn)定。 A藥固體分散休膠囊的藥物動力學實驗：采用3P97程序?qū)ψ灾艫藥膠囊與國外對照品的血藥濃度數(shù)據(jù)進行處理，依AIC法判斷其藥時曲線符合單室模型，

13、各種藥動學參數(shù)為： 自制A藥固體分散體膠囊： C<,max>：52.06±7.08 ng/mL T<,max>：1.41±0.34 h AUC<,(0-t>)：433.70±68.08 min．ng．ml<-1> AUC<'(0～∞)>：571.87±147.63 min.ng.ml<'-1>外對照物A藥膠囊： C<,max>：43.12±11.80 ng/mL T<,max>：1.31±0.25 h AUC(0．t)：

14、393.07±71.20 min.ng.ml<'-1> AUC<'(0～∞)>：519.92±95.65 min.ng.ml<'-1> 自制A藥膠睫的相對生物利用度分別為112.5％±2.07％和112.1％±3.39％，經(jīng)方差分析及雙單側(cè)t檢驗，自制生產(chǎn)的A藥膠囊的AUC<,(0-t)>和AUC<'(0～∞)>的90％可信限分別為98.6％～123.2％和84.4％～115.0％，均落在國外對照品的80％～125％范圍內(nèi)；C<,max

15、>的90％可信限為99.8％～130.8％，在國外對照品C<,max>的70％ 143％范圍內(nèi)：T<,max>經(jīng)非參數(shù)榆驗與國外對照品無顯著性差異。因此，自制生產(chǎn)的A藥膠囊與國外牛產(chǎn)的A藥膠囊生物等效。 結(jié)論：以上各項實驗證明：A藥制備成固體分散體膠囊，能夠大大增加原料藥溶解度，提高其溶出度及生物利用度，與國外對照品達到生物等效，從而保證了在臨床應(yīng)用的療效。制備該藥物的固體分敞體所采用的制備方法適合工業(yè)大生產(chǎn)，穩(wěn)定性良好，具有