表達FasL基因Hela細胞誘導淋巴細胞凋亡的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：應用FasL基因轉染具有上皮細胞特性的Hela細胞，探討FasL基因的表達對誘導淋巴細胞凋亡的作用，為解決同種異體組織工程化皮膚的免疫排斥問題提供一條研究途徑?！　》椒ǎ簩LNCX2-FasL質粒轉化大腸桿菌，抽提純化的pLNCX2-FasL質粒用限制性內切酶XhoI，NotI酶切，瓊脂糖凝膠電泳得到755kp大小的目的條帶。在紫外燈下切割回收目的條帶并抽提純化得到FasL基因，用XhoI，NotI酶切pCDNA3.1質粒載體

2、并在相同位點插入FasL基因；T4DNA酶連接，構建pCDNA3.1-FasL重組質粒。利用脂質體轉染法將pCDNA3.1-FasL基因轉染Hela細胞，G418篩選；篩選后的Hela細胞經(jīng)過免疫細胞化學法，RT-PCR鑒定后，實驗組和對照組與同種異體淋巴細胞共培養(yǎng)后，進行了淋巴細胞染色體DNA斷裂測定、淋巴因子RT-PCR、淋巴細胞計數(shù)、單項淋巴細胞混合試驗等實驗，檢測了FasL基因對誘導淋巴細胞凋亡的作用?！　?主要結論：表達Fa

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