活性維生素D3對IgA腎病大鼠TLR4、MyD88、NF-κB表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  建立IgA腎病大鼠模型,觀察IgA腎病大鼠腎組織中TLR4、MyD88、NF-κB的表達,研究活性維生素D3對IgA腎病大鼠TLR4、MyD88、NF-κB表達的影響。探討活性維生素D3對IgA腎病的發(fā)展的保護作用的可能機制。
  方法:
  選取SPF級別的SD雄性大鼠48只,運用牛血清白蛋白(BSA)+脂多糖(LPS)+四氯化碳(CCL4)方法(共9周)建立實驗性IgA腎病大鼠模型。分為正常對照組、模型

2、組、治療組。治療組第10周開始給予活性維生素D3溶于0.05ml花生油以0.03ug/kg.d灌胃治療,持續(xù)8周,同時間模型組和對照組每日給予同等量花生油灌喂。在第13周時各組分別處死一半大鼠,剩余的直到實驗結束(第17周)后處死。實驗期間,觀察以下指標:1、大鼠的一般情況;2、大鼠的24h尿蛋白、血肌酐、血白蛋白等指標;3、行光鏡病理及免疫熒光,鑒定造模是否成功;4、采用免疫組織化學二步法檢測腎組織中TLR4、MyD88、NF-κB的

3、表達;5、半定量RT-PCR檢測腎組織TLR4、MyD88、NF-κB表達。
  結果:
  (1)在整個實驗過程中,正常對照組大鼠的一般情況良好,而造模組大鼠在造模后出現(xiàn)不同程度的食欲不振,精神萎靡,治療組在經(jīng)過治療后,癥狀有所緩解;
  (2)對照組在整個實驗期間,24h尿蛋白、血肌酐、血白蛋白等均無明顯變化,而模型組與治療組在造模成功時,24h尿蛋白、血肌酐均較正常對照組升高,血白蛋白下降,差異具有統(tǒng)計學意義(P

4、<0.05),在經(jīng)過活性維生素D3治療后,24h尿蛋白、血肌酐水平均下降,血白蛋白上升,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),治療8周較治療4周上述變化更明顯,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);
  (3)病理光鏡示正常對照組未見明顯的腎小球系膜細胞增生,腎小管結構規(guī)則,腎間質(zhì)無炎性細胞浸潤;模型組腎小球系膜基質(zhì)明顯增多,系膜細胞增生,腎間質(zhì)可見炎性細胞浸潤;免疫熒光示模型組腎小球系膜區(qū)可見團塊狀綠色IgA熒光,而正常對照組未見I

5、gA沉積。
  (4)免疫組化結果提示模型組及治療組腎組織TLR4、MyD88、NF-κB表達均高于正常對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),治療組與模型組相比, TLR4、MyD88、NF-κB的表達強度相對較弱,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);治療8周時與治療4周時相比TLR4、MyD88、NF-κB的表達強度更弱,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
  (5)半定量RT-PCR結果顯示IgA腎病成模后TLR4、

6、MyD88、NF-κB mRNA表達明顯增加,與正常對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),治療組與模型組相比,TLR4、MyD88、NF-κB mRNA的表達均下降,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。治療8周時與治療4周時相比TLR4、MyD88、NF-κB mRNA的表達強度更弱,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
  結論:
  通過上調(diào)TLR4及MyD88的表達,進而上調(diào)NF-κB的表達而引起炎性反應,可能為Ig

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