1,25-二羥維生素D3對(duì)IgA腎病大鼠Treg細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、目的：
　　1,25二羥維生素 D3（1α,25-dihydroxyvitamin D3,1,25(OH)2D3）是體內(nèi)最重要的維生素D3的活性代謝產(chǎn)物,在體內(nèi)與配體結(jié)合，在細(xì)胞核內(nèi)與目標(biāo)基因啟動(dòng)子區(qū)域的反應(yīng)原件綁定，誘導(dǎo)或抑制目標(biāo)基因的表達(dá)。最近研究報(bào)道指出，1，25( OH)2D3可作為免疫調(diào)節(jié)劑治療如、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、白塞病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等免疫性疾病。調(diào)節(jié)性 T細(xì)胞(Regulatory T cells, Treg cell

2、s)在維持免疫耐受方面起了很大的作用，Treg細(xì)胞過少或功能缺失會(huì)導(dǎo)致Th1，Th2細(xì)胞相關(guān)的炎癥反應(yīng)加重。本文探討1,25-二羥維生素D3對(duì)IgA腎病大鼠Treg細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用。
　　方法：
　　1）選用Wister大鼠52只，隨機(jī)抽取8只大鼠作為正常對(duì)照組（A組），余44只采用口服牛血清白蛋白粘膜免疫制作IgA腎病模型；2）剔除死亡大鼠，將剩余大鼠隨機(jī)分為模型組、1,25(OH)2D3治療組、強(qiáng)的松治療組、及強(qiáng)的松與1,

3、25(OH)2D3聯(lián)合治療組，分別為B、C、D、E組，每組8只，治療組分別進(jìn)行藥物干預(yù)；3）分別檢測(cè)各組大鼠24小時(shí)尿蛋白定量、尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及血清鈣的變化，采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(Real-time polymerase chain reaction， Real-time pCR)檢測(cè)各大鼠脾臟淋巴細(xì)胞人叉頭框蛋白 p3（forkhead boxp3， Foxp3）mRNA的水平，采用Western blot法檢測(cè)大鼠脾臟淋巴細(xì)胞

4、Foxp3蛋白水平的變化。
　　結(jié)果：
　　1)各組大鼠尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的變化：模型組(328±7.04個(gè)/ul)與正常對(duì)照組(5.03±2.55個(gè)/ul)相比，尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著增高，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)；1,25(OH)2D3治療組(162±5.36個(gè)/ul)、聯(lián)合治療組(9±3.15個(gè)/ul)及強(qiáng)的松治療組(18±3.06個(gè)/ul)與模型組(328±7.04個(gè)/ul)相比，尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)較模型大鼠明顯降低，差別有統(tǒng)

5、計(jì)學(xué)意義(p<0.05)，且聯(lián)合用藥大鼠尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)降低更加顯著。2)各組大鼠24小時(shí)尿蛋白的影響：模型組(49.37±2.96 mg/d)與正常對(duì)照組(7.27±0.86 mg/d)相比，24小時(shí)尿蛋白顯著增高，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)；1,25(OH)2D3治療組(21.05±2.06 mg/d)、聯(lián)合治療組(10.16±1.39 mg/d)及強(qiáng)的松治療組(15.26±1.57 mg/d)與模型組(49.37±2.96 mg

6、/d)相比，24小時(shí)尿蛋白較模型組明顯降低，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)，且聯(lián)合用藥組24小時(shí)尿蛋白降低更加顯著。3）各組大鼠血鈣水平的影響：正常對(duì)照組(2.35±0.22 mmol/L)、模型組(2.28±0.17 mmol/L)、1,25(OH)2D3治療組(2.44±0.11 mmol/L)、聯(lián)合治療組(2.50±0.14 mmol/L)及強(qiáng)的松治療組(2.38±0.09 mmol/L)血鈣水平未見顯著變化，差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

7、4）大鼠脾臟淋巴細(xì)胞Foxp3 mRNA的表達(dá)的影響：模型組（0.0094±0.115）Foxp3表達(dá)較正常對(duì)照組（1.075±0.065）顯著降低，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。1,25(OH)2D3治療組(0.245±0.194)、聯(lián)合治療組（0.713±0.026）及強(qiáng)的松治療組（0.442±0.139）與模型組（0.0094±0.115）相比，F(xiàn)oxp3的表達(dá)明顯升高，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)，且聯(lián)合用藥組Foxp3

8、的表達(dá)升高更加顯著。5）大鼠脾臟淋巴細(xì)胞Foxp3蛋白表達(dá)的變化：模型組（0.735±0.162）Foxp3蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組（1.863±0.018）顯著降低，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。1,25(OH)2D3治療組（1.211±0.074）、聯(lián)合治療組（1.782±0.015）及強(qiáng)的松治療組（1.476±0.026）與模型組（0.735±0.162）相比，F(xiàn)oxp3的表達(dá)明顯升高，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)，且聯(lián)合用藥