TLR4及MyD88在大鼠局灶性腦缺血耐受過(guò)程中的表達(dá)及作用.pdf

1、前言:
　　 大部分的神經(jīng)外科手術(shù)都會(huì)給患者帶來(lái)腦缺血性的副損傷,給手術(shù)預(yù)后造成極大的影響。為解決這一難題,人們?cè)谘芯恐邪l(fā)現(xiàn)短暫腦缺血、缺氧、內(nèi)毒素、促炎癥細(xì)胞因子等因素預(yù)處理動(dòng)物模型可誘導(dǎo)動(dòng)物腦細(xì)胞產(chǎn)生耐受效應(yīng)。預(yù)處理耐受即為事先給予少于致死量藥物或造成較輕微的炎癥反應(yīng),從而緩解接下來(lái)的致死損傷,產(chǎn)生一定的腦保護(hù)效應(yīng)。據(jù)現(xiàn)有研究表明,這種耐受效應(yīng)的產(chǎn)生與外界的刺激的性質(zhì)有很大關(guān)系,如腦缺氧預(yù)處理可通過(guò)細(xì)胞內(nèi)線粒體結(jié)構(gòu)改變調(diào)整自

2、身能量?jī)?chǔ)備,從而減少了損傷性的腦缺氧傷害,預(yù)先給予動(dòng)物小劑量刺激后將明顯降低致死劑量的所造成的動(dòng)物死亡率[1]。依照同樣原理造成短時(shí)間人為缺血損傷構(gòu)造預(yù)缺血模型發(fā)現(xiàn)預(yù)處理還可誘使機(jī)體產(chǎn)生缺血耐受,可建立耐受狀態(tài)保護(hù)大腦免受致死性的缺血損傷[2]。在這些預(yù)處理實(shí)驗(yàn)中共同檢測(cè)到了TLR4下調(diào)表達(dá)引起了人們的關(guān)注。本實(shí)驗(yàn)立足現(xiàn)有研究成果為基礎(chǔ),進(jìn)一步探討預(yù)先給腦組織一個(gè)小劑量的缺血再灌注損傷后是否對(duì)腦組織再次面臨致死性缺血再灌注損傷時(shí)起到保護(hù)

3、作用,并進(jìn)一步探討TLR4蛋白在這種保護(hù)性作用機(jī)制中所起到的功能。
　　 材料與方法:
　　 按文獻(xiàn)所述,建立ZeaLonga改良法大鼠大腦中動(dòng)脈線栓法預(yù)缺血處理模型。健康成年SD大鼠(中國(guó)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)中心提供)60只(體重220-250克,雄性),隨機(jī)分成3組:A.對(duì)照組(n:20只),B.損傷性缺血再灌注組(n=20只),C.缺血預(yù)處理組(n=20只)。C組為大腦中動(dòng)脈線栓15min,A,B組做假手術(shù)處理,共同飼養(yǎng)4

4、8小時(shí)后B,C組做損傷性缺血再灌注90min,A組做假手術(shù)處理,三組分別于處理后12h、24h處死大鼠。處死大鼠取出鼠腦后做鼠腦冠狀切片TTC染色,余組織采用westernblot方法進(jìn)行分析蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 大鼠腦缺血模型建立成功。通過(guò)干濕法進(jìn)一步檢測(cè)大鼠各組間腦水腫程度分析,我們可以檢測(cè)到經(jīng)過(guò)預(yù)缺血再灌注的大鼠腦組織,再次面臨致死性缺血再灌注傷害時(shí)其水腫程度明顯降低。通過(guò)各組大鼠各不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)鼠腦TLR