蛋白酶體抑制劑MG132對非小細胞肺癌生長、轉(zhuǎn)移和放射敏感性的影響及機制的研究.pdf

1、碩士學(xué)位論文論文題目蛋白酶體抑制劑MG132對非小細胞肺癌生長、轉(zhuǎn)移和放射敏感性的影響及機制的研究研究生姓名劉靜指導(dǎo)教師姓名曹建平（教授）專業(yè)名稱放射醫(yī)學(xué)研究方向腫瘤放射生物學(xué)論文提交日期2013年5月蛋白酶體抑制劑蛋白酶體抑制劑MG132對非小細胞肺癌生長轉(zhuǎn)移和放射敏感性的影響及機制對非小細胞肺癌生長轉(zhuǎn)移和放射敏感性的影響及機制中文摘要中文摘要I中文摘要目的探討蛋白酶體抑制劑MG132聯(lián)合X射線對人非小細胞肺癌A549和H1299細胞

2、生長、轉(zhuǎn)移侵襲、細胞凋亡和周期、放射敏感性的影響及機制如何，進一步構(gòu)建人非小細胞肺癌的裸鼠移植瘤，在體內(nèi)驗證MG132的致放射增敏作用。方法（一）體外實驗：1、MTT法檢測不同MG132濃度不同預(yù)處理時間聯(lián)合X射線下肺癌A549和H1299細胞的增殖變化；2、劃痕實驗和Transwell小室實驗分別測定肺癌A549細胞和H1299細胞的遷移能力；3、Transwell小室實驗檢測肺癌A549和H1299細胞的侵襲能力；4、克隆形成法檢測

3、MG132對A549和H1299細胞的放射敏感性的影響；5、流式細胞術(shù)測定肺癌A549和H1299細胞的周期分布和細胞凋亡的影響；6、Westernblot法測定細胞蛋白表達水平的改變。（二）體內(nèi)試驗：建立25只裸鼠皮下人非小細胞肺癌移植瘤模型，將移植瘤模型裸鼠隨機分為對照組、MG132組、照射組、照射MG132組。測量每組移植瘤模型裸鼠的體重和腫瘤體積并繪制體重變化曲線和腫瘤生長曲線，同時計算各組的腫瘤生長抑制率。結(jié)果（一）體外實驗結(jié)

4、果：1.1、在無X射線照射下，MG132單獨作用于人非小細胞肺癌A549和H1299細胞后表現(xiàn)出顯著的細胞生長抑制作用，呈現(xiàn)劑量效應(yīng)和處理時間效應(yīng)關(guān)系，我們選擇細胞存活90%以上時的MG132濃度（0.1μM）作為MG132實驗劑量（nontoxicdose，無毒性劑量）用于后續(xù)實驗的進行。1.2、在聯(lián)合4GyX射線照射下，隨著照前應(yīng)用MG132預(yù)處理上述兩種細胞的時間不斷增加，兩種細胞的存活率不斷下降（P0.01）。1.3、MG132

5、預(yù)處理上述兩種細胞6h后聯(lián)合X射線照射，隨著照射劑量的增加，兩種細胞的存活率不斷下降（P0.01）；2.1、MG132聯(lián)合X射線可顯著抑制人非小細胞肺癌A549和H1299細胞的遷移能力。2.2、MG132聯(lián)合X射線可顯著抑制人非小細胞肺癌A549和H1299細胞的侵襲能力（P0.05）；3.1、MG132預(yù)處理上述兩種細胞6h后聯(lián)合X射線照射，細胞的克隆存活率均隨照射劑量的增加而減少（P0.01）。―單擊多靶模型‖顯示，A549細胞單