基質細胞Cav-1表達影響骨髓瘤細胞對蛋白酶體抑制劑的敏感性.pdf

1、碩士學位論文論文題目基質細胞Cav1表達影響骨髓瘤細胞對蛋白酶體抑制劑的敏感性研究生姓名陳露指導教師姓名傅晉翔（教授）專業(yè)名稱內科學（血液病學）研究方向多發(fā)性骨髓瘤的基礎與臨床論文提交日期2013年3月基質細胞Cav1表達影響骨髓瘤細胞對蛋白酶體抑制劑的敏感性中文摘要I基質細胞Cav1表達影響骨髓瘤細胞對蛋白酶體抑制劑的敏感性中文摘要第一部分靶向人小窩蛋白caveolin1基因的shRNA真核表達質粒的構建及其在人臍靜脈內皮細胞株HUV

2、EC中的穩(wěn)定表達目的目的：利用靶向人Cav1基因的短發(fā)夾RNA（shRNA）真核表達質粒，轉染人臍靜脈內皮細胞HUVEC，并篩選出穩(wěn)定轉染的克隆細胞株。方法方法：針對Cav1基因的mRNA序列設計并分別構建3個以shRNA質粒表達載體（pGPHINeoCav1homo526、pGPHINeoCav1homo548、pGPHINeoCav1homo781）和1個陰性對照質粒表達載體，采用脂質體法轉染人臍靜脈內皮細胞株HUVEC，G418篩

3、選后，經免疫印跡和共聚焦顯微鏡分析HUVECCav1的表達，選取抑制效應最強的一組，構建穩(wěn)定表達Cav1shRNA的HUVEC細胞株（實驗組）和穩(wěn)定表達controlshRNA的HUVEC細胞株（載體對照組）。結果：結果：穩(wěn)定表達Cav1shRNA的HUVEC細胞株（實驗組）命名為HUVECcav1knowndown，穩(wěn)定表達controlshRNA的HUVEC細胞株（載體對照組）命名為HUVECcav1control。質粒穩(wěn)定轉染后檢