獨活及穿山龍的研究.pdf

1、本論文運用現(xiàn)代中藥化學(xué)、儀器分析等多種實驗技術(shù)對中藥獨活和穿山龍作了研究。共分為兩部分： 第一部分：獨活的研究。包括獨活及指紋圖譜的研究進展、獨活中蛇床子素的含量測定和獨活藥材的指紋圖譜研究。獨活為常用中藥，其原植物約在20種以上?！吨腥A人民共和國藥典》(2000版)收載傘形科植物重齒毛當(dāng)歸AngelicapubescensMaximf.bierrataShanetYuan的干燥根為獨活正品，但商品獨活種類比較混亂，主流商品有川

2、獨活、香獨活、牛尾獨活和九眼獨活4大類。川獨活為栽培植物，香獨活為栽培或野生植物，它們的原植物為重齒毛當(dāng)歸；牛尾獨活的原植物為獨活，以上三大類都是傘形科植物。九眼獨活的原植物有食用土當(dāng)歸、龍眼獨活和柔毛龍眼獨活3種，屬于五加科植物。通過外觀形態(tài)有時很難區(qū)分，因此進行獨活品種來源研究，測定其主要有效成分的含量，制定其相應(yīng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和指紋圖譜，指導(dǎo)獨活藥材的GAP規(guī)范化種植，整頓現(xiàn)有的藥材來源市場，開發(fā)獨活潛在的藥用價值。根據(jù)中華人民共和國

3、藥典2005版修訂成都會議精神，將獨活含量測定的薄層掃描法改為高效液相色譜法。建立了高效液相色譜法測定獨活中蛇床子素的含量。色譜柱：YWGODSC18柱(250mm×4.6mm，10μm)，流動相：乙腈—水(6：4)，流速為1.0mL·min-1，檢測波長：322nm，柱溫：室溫。蛇床子素在10～150μg·mL-1的濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系(r=0.9999)，平均回收率(n=9)為99.5％。本方法簡便、快捷、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，完成

4、了國家藥典委員會下達的任務(wù)。按照《中藥指紋圖譜研究指導(dǎo)原則(討論稿)》及有關(guān)文獻，研究并采用Rp-HPLC方法制訂了獨活藥材的指紋圖譜檢測標(biāo)準(zhǔn)。不僅可以進行獨活的真?zhèn)舞b別，還可以同時測定其主要有效成分的含量。建立藥材的指紋圖譜標(biāo)定了10個特征峰，指紋圖譜采集時間為80min，8批藥材中，除1號(四川九原)樣品相似度最低，僅為0.64，其余7批相似度較高，在0.85～0.93之間。結(jié)果表明，本研究所建立的指紋圖譜分析方法的精確、重現(xiàn)性良好

5、、穩(wěn)定。 第二部分：穿山龍的研究。包括穿山龍的的研究進展、穿山龍中薯蕷皂苷的提取分離、以薯蕷皂苷為對照品，采用HPLC-ELSD法對不同產(chǎn)地的穿山龍藥材和不同批次的地奧心血康膠囊的含量進行測定。穿山龍為薯蕷科植物穿龍薯蕷DioscoreanipponicaMakino的干燥根莖，具有活血舒筋、消食利水、祛痰截瘧之功效。陜西是穿龍薯蕷的主要產(chǎn)地之一，資源較為豐富，為了進一步開發(fā)和利用資源，對穿山龍主要成分薯蕷皂苷的提取分離、結(jié)構(gòu)鑒

6、定，并以薯蕷皂苷為對照品，對藥材和制劑進行含量測定的系統(tǒng)研究。文獻報道的含量測定成分多用高效液相-紫外檢測法測定穿山龍中薯蕷皂苷元或酸水解后產(chǎn)生的薯蕷皂苷元的含量，而且測定穿山龍中薯蕷皂苷元須經(jīng)藥材酸水解、萃取、調(diào)節(jié)pH等步驟，操作繁瑣。由于薯蕷皂苷為甾體皂苷，分子式中沒有共軛結(jié)構(gòu)，采用紫外法檢測較為困難，故改用蒸發(fā)光檢測器，效果較好。本文采用HPLC-ELSD法(高效液相-蒸發(fā)光檢測器)，對穿山龍及其含藥制劑中薯蕷皂苷的含量進行了測定

7、研究。實驗重現(xiàn)性好，高效靈敏，為生藥及制劑的質(zhì)量控制提供依據(jù)。實驗所用穿山龍藥材于2004年5月采自西安市長安區(qū)豐峪口，挖取根莖，除去地上部分、須根和外皮(栓皮)，曬干，切段后適當(dāng)粉碎，約10kg，得薯蕷皂苷純品39.2g，提取率為0.39％。建立了HPLC-ELSD法測定了穿山龍和地奧心血康膠囊中薯蕷皂苷的含量。色譜柱：YWGC18柱，250×4.6mm，10μm；流動相：乙腈：水(55：45)；流速：1.0mL·min-1；載氣流速

8、2.4mL·min-1；霧化溫度：90.3℃左右；柱溫：室溫。穿山龍中薯蕷皂苷的線性范圍為：80～600μg·mL-1(r=0.9998)。平均回收率為99.88％，RSD=1.25％(n=9)。地奧心血康膠囊中薯蕷皂苷的線性范圍為：160～600μg·mL-1(r=0.9999)。平均回收率為100.16％，RSD=1.65％(n=9)。本方法簡便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，可作為中藥穿龍薯蕷的質(zhì)量控制，亦可作為控制地奧心血康膠囊含量的標(biāo)準(zhǔn)。