兒童不明原因出血病例的vWF、FV、GP1Bα基因研究.pdf

1、目的:
　　了解廣西地區(qū)先天性不明原因出血及ITP療效不好或經(jīng)抗血小板取得較好治療效果的患兒血管性血友病因子(von Willebrangfactor，vWF)28外顯子、因子V(Factor V，F(xiàn)V)10外顯子、血小板膜糖蛋白Ⅰba(platelet glycoproteinⅠb alpha，GPⅠba)基因變異情況以了解該地區(qū)不明原因出血兒童在遺傳性出凝血紊亂疾病上的發(fā)病情況，為防治該病提供依據(jù)。
　　方法:
　

2、　(1)收集2009年3月至2011年1月在我院兒科門診及住院部就診的不明原因出血18例，以及雖然臨床診斷為ITP，按ITP治療無效或效果不好而經(jīng)抗血小板治療能取得較好的效果病例共13例，共計31例。
　　(2)對所收集的病人進行常規(guī)血漿凝血酶原時間、凝血酶時間、活化部分凝血活酶時間以及血漿因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ促凝活性測定除外相應的凝血因子缺乏所導致相應遺傳性疾病。
　　(3)用血液基因組DNA抽提試劑盒提取DNA。
　

3、　(4)對所收集的病人進行VWF基因第28外顯子(vWF28)、FV基因第10外顯子(FV10)、GPⅠ ba基因全長DNA進行聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction，PCR)、DNA測序等技術查找基因變異。
　　結果:
　　31例病人中vWF28、FV10、GPⅠ ba基因外顯子全部擴增成功，檢出vWF28外顯子V1229I1例，T1381A10例(32.25％)、D1472H8例(25.81％

4、)、V1565L21例(67.74％)經(jīng)查閱基因SNP數(shù)據(jù)庫后三者為多態(tài)性位點;檢出FV10多態(tài)性位點R513K22例(70.97％);檢出GP1bα基因多態(tài)性位點T119S1例、L561I17例(54.84％)。
　　結論:
　　(1)vWF28外顯子V1229I變異有可能是一種新的基因突變;臨床上一些不明原因出血病人，不排除部分病人可能存在vWF基因變異。
　　(2)FV10、GP1bα基因變異有可能不是廣西地區(qū)不