天然免疫新分子ERIS的鑒定及相關抗病毒作用機制的研究.pdf

1、天然免疫是宿主抵抗病原微生物入侵的第一道防線,是一種生物體長期進化過程中形成的很保守的防御機制。近20年來,研究人員發(fā)現(xiàn)天然免疫對于機體抵抗病毒入侵發(fā)揮重要作用。病毒感染宿主細胞后,主要由一類模式識別受體識別(germline-encoded pattern recognition receptors, PRRs),這些受體介導I型干擾素及炎性細胞因子的產生,并受到多種嚴格的調控機制的調控。近年來,人們對天然免疫信號通路的研究取得了很大

2、進展,但是仍然有很多問題沒有解決,尤其是胞內識別病毒RNA和DNA的信號通路研究的還不完善,參與胞內天然免疫通路的很多新基因尚未發(fā)現(xiàn)。
　　為了深入研究固有免疫信號轉導分子機制,我們利用經(jīng)過VSV病毒、脂多糖LPS和單鏈RNA處理過的骨髓來源的巨噬細胞cDNA表達文庫大規(guī)模功能性篩選激活干擾素IFNβ,IFNα4,IFNα8啟動子的固有免疫新基因。最后,我成功地篩選到一個天然免疫新分子并命名為 ERIS(an endoplasmi

3、c reticulum IFN stimulator,ERIS)。除了ERIS我還篩選到已知的激活IFNα4啟動子的陽性分子IRF1,表明此篩選系統(tǒng)是有效的。
　　ERIS在細胞抗病毒免疫過程中起重要作用,過量表達ERIS強烈地激活細胞內抗病毒通路并誘導產生大量的I型干擾素和I型干擾相關基因表達上調,同時也激活炎癥相關因子從而抑制多種病毒的復制。Eris缺陷細胞完全喪失胞內DNA誘導的I型干擾素產生的能力并且導致DNA病毒大量擴增

4、,說明ERIS主要參與細胞內 DNA誘導的天然免疫信號通路。ERIS是一跨膜蛋白,我們研究發(fā)現(xiàn)ERIS定位于內質網(wǎng),正確定位對其功能的行使至關重要,經(jīng)過DNA病毒感染后, ERIS發(fā)生很明顯的轉位變化。跨膜區(qū)附近的RIR和RYR作為兩個內質網(wǎng)滯留序列,對其定位在內質網(wǎng)及維持蛋白穩(wěn)定性是必需的。ERIS在細胞受到病毒感染等免疫刺激后發(fā)生包括泛素化、磷酸化、二聚化等多種修飾作用。Coumermycin誘導的ERIS天然二聚體可以快速強烈地誘

5、導下游 I型干擾素的上調,闡明了ERIS通過形成同源二聚體活化抗病毒信號通路的反應機制。
　　我們實驗室發(fā)現(xiàn)一條由病毒感染誘導的STAT6活化,并最終特異調控一類免疫細胞趨化因子(CCL2和CCL20)表達上調的新通路。Eris和Tbk1缺陷MEF細胞喪失了由SeV和HSV-1對STAT6-CCL2通路的活化;Mavs缺陷MEF細胞也失去SeV對STAT6-CCL2通路的活化,而不影響HSV-1的活化效應。說明ERIS、TBK1和