左旋多巴對大鼠中腦小膠質(zhì)細胞的影響.pdf

1、帕金森病(Park inson,sdisease，PD)是一種常見的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，以中腦黑質(zhì)致密部多巴胺（DA）能神經(jīng)元變性壞死和出現(xiàn)Lewy小體為主要病理特點。左旋多巴（L-Dopa）是PD治療上的主要藥物之一，目前關(guān)于L-Dopa的毒性存在爭議，長期的動物體內(nèi)研究與臨床研究結(jié)論不一。6-OHDA制作的PD模型能模擬PD的病理過程，模型中可以觀察到小膠質(zhì)細胞的激活及炎癥因子TNF-a等增加，最終介導(dǎo)DA能神經(jīng)元的缺失。本實驗以6

2、-OHDA的PD模型為對照，觀察L-Dopa的腦內(nèi)直接注射以及灌胃給藥能否產(chǎn)生類似6-OHDA的毒性，引起小膠質(zhì)細胞的增生激活并介導(dǎo)DA能神經(jīng)元的損傷，初步探討L-Dopa可能的毒性，為臨床L-Dopa的安全合理用藥提供依據(jù)。
　　1、方法：
　　（1）取SD大鼠，隨機分成實驗組與對照組，實驗組大鼠左側(cè)紋狀體內(nèi)分別注射6-OHDA(5ug/uL)、不同劑量L-Dopa（50ug/uL、5ug/uL、1ug/uL），對照組注射

3、等量生理鹽水；
　?。?）取SD大鼠，隨機分成實驗組與對照組，實驗組大鼠灌胃分別給不同劑量L-Dopa（200mg/kg.d、100mg/kg.d、10mg/kg.d），對照組注射等量生理鹽水；
　?。?）術(shù)后觀察各組經(jīng)阿樸嗎啡誘導(dǎo)后大鼠旋轉(zhuǎn)行為的改變；
　?。?）術(shù)后4周取實驗組和對照組腦組織行免疫組織化學(xué)染色，觀察黑質(zhì) DA能神經(jīng)元數(shù)量變化；行免疫熒光技術(shù)染色,觀察大鼠中腦黑質(zhì)致密部中的小膠質(zhì)細胞激活情況及TNF-

4、α水平的改變；
　　2、結(jié)果：
　?。?）與對照組相比，術(shù)后4周6-OHDA誘導(dǎo)的PD大鼠模型可觀察到腦黑質(zhì)中小膠質(zhì)細胞的激活（P<0.001）、TNF-a水平的增高（P<0.001）及DA能神經(jīng)元的減少（P<0.001）；
　?。?）與對照組相比，術(shù)后4周直接腦內(nèi)注射高劑量L-Dopa的正常大鼠可觀察到腦黑質(zhì)中小膠質(zhì)細胞的激活（P<0.05）、TNF-α水平的增高（P<0.05）及 DA能神經(jīng)元的減少（P<0.05）

5、；
　?。?）與對照組相比，術(shù)后4周正常大鼠直接腦內(nèi)注射中、低劑量L-Dopa、灌胃給各劑量L-Dopa未發(fā)現(xiàn)腦黑質(zhì)中小膠質(zhì)細胞的激活（P>0.05）、TNF-α水平的增高（P>0.05）及DA能神經(jīng)元的減少（P>0.05）。
　　3、結(jié)論：
　　（1）健康大鼠腦內(nèi)直接注射高濃度L-Dopa可產(chǎn)生與6-OHDA相似的神經(jīng)毒性，即引起小膠質(zhì)細胞的激活及DA能神經(jīng)元的受損，但一般口服劑量L-Dopa對健康大鼠沒有發(fā)現(xiàn)神經(jīng)毒