圍產期小鼠子宮頸中糖皮質激素受體、11β羥基類固醇脫氫酶1和2的免疫定位.pdf

1、宮頸成熟(Cervical ripening)是正常分娩的必要條件，不是繼發(fā)于子宮收縮的被動過程，而是一個多種內分泌因素參與的主動耗能、炎性細胞浸潤的過程。各種激素和炎癥介質通過直接或間接調節(jié)宮頸內組織學、生物化學、及形態(tài)學變化來發(fā)揮它們特有的生理功能使宮頸成熟軟化。其中糖皮質激素及其受體的作用一直備受關注，但其調控機制尚不清楚。本研究旨在對這一機制進行初步闡釋。糖皮質激素(Glucocorticoid,GC)是腎上腺皮質層束狀帶合成和

2、分泌的一類甾體激素，在機體的代謝和應激等過程中起著重要的作用。糖皮質激素通過與其受體結合發(fā)揮生物學效應，其在組織的表達量在一定程度上決定了組織對GC的敏感性。11βHSD-1和11βHSD-2是調節(jié)耱皮質激素活性的轉化酶，二者作用相反，分別可以活化/失活GC，共同調節(jié)局部組織細胞內糖皮質激素的活性與有效濃度，所以，局部組織對糖皮質激素的的敏感性還取決于糖皮質激素代謝酶的表達量與反應方向。
　　糖皮質激素是參與分娩的重要激素，通過與

3、其受體結合發(fā)揮生物學效應，但其對子宮頸成熟擴張的調控機制尚不清楚。本研究旨在揭示糖皮質激素(GC)及糖皮質激素受體(GR)、11β羥基類固醇脫氫酶1和2(11βHSD-1和2)對圍產期小鼠子宮頸成熟的影響和機制。實驗選取圍產期5個時間點，分別為產前48 h(-48 h)、產前24 h(-24 h)、分娩時(0 h)、產后12 h(+12h)和產后48 h(+48 h)，通過ELISA檢測小鼠血清皮質酮濃度變化;用Western Blot

4、法檢測兔抗人11βHSD-1和-2多克隆抗體及兔抗人糖皮質激素受體(NR3C1)多克隆抗體在圍產期小鼠子宮頸組織中的特異性;用免疫組織化學法分別對NR3C1、11βHSD-1和11βHSD-2進行進行免疫定位和半定量檢測。結果顯示:ELISA結果顯示圍產期糖皮質激素的濃度呈先升高后下降趨勢，分娩時達到峰值(P＜0.01); Western Blot法檢測出在35KDa、44KDa和86KDa處分別有11βHSD-1和-2以及NR3C1蛋

5、白特異性條帶的存在。11βHSD-1、11βHSD-2和GR的免疫組化陽性染色主要分布于子宮頸的腔上皮、基質、血管和平滑肌細胞，且11βHSD-1/11βHSD-2平均光密度的比值呈現(xiàn)先升高再下降趨勢，分娩時比值最高;GR的表達量也是分娩時最高，分娩前后較低的趨勢(P＜0.01)。
　　以上結果提示分娩時11βHSD-1合成的糖皮質激素及其受體大量增加，參與子宮頸的成熟軟化，分娩后外周血液循環(huán)和子宮頸局部組織糖皮質激素水平降低且糖