11β-羥基類固醇脫氫酶1在激素性股骨頭壞死中的作用評(píng)價(jià).pdf

1、11β-羥基類固醇脫氫酶1(11β-hydroxysteroid dehydrogenase1，11β-HSD1)是調(diào)節(jié)糖皮質(zhì)激素(glucocorticoid，GC)的關(guān)鍵酶，成骨細(xì)胞中主要表達(dá)(1)型酶，它可以催化無(wú)活性的皮質(zhì)酮為有活性的皮質(zhì)醇，是GC受體前調(diào)節(jié)的關(guān)鍵因素。在骨髓微環(huán)境中成骨細(xì)胞對(duì)GC的轉(zhuǎn)換作用對(duì)維持局部活性皮質(zhì)醇濃度的穩(wěn)定具有重要作用，因此調(diào)節(jié)11β-HSD1可能是成骨細(xì)胞分化與功能的重要決定因素。但這種基于成骨細(xì)

2、胞11β-HSD1的局部活性激素的調(diào)節(jié)是否參與了激素性股骨頭壞死(SANFH)的形成，如參與了其價(jià)值有多大？尚無(wú)相關(guān)文獻(xiàn)可查。
　　[目的]
　　通過(guò)SANFH模型建立及成骨細(xì)胞的體外分離培養(yǎng)，在不同情況下對(duì)11β-HSD1進(jìn)行作用，觀察整體及局部應(yīng)用酶活性抑制劑后，對(duì)股骨頭局部骨質(zhì)維持的狀態(tài)的影響，以及不同部位骨組織成骨細(xì)胞11β-HSD1的表達(dá)及活性差異。從成骨、成脂肪相關(guān)基因表達(dá)的改變，初步評(píng)價(jià)成骨細(xì)胞中11β-HSD

3、1的功能以及在SANFH發(fā)生過(guò)程中的可能作用。
　　[方法]
　　1.通過(guò)超量地塞米松注射法建立激素性股骨頭壞死的模型，并利用微觀計(jì)數(shù)等方法評(píng)估模型的制作效果。
　　2.基于SANFH模型，全身應(yīng)用11β-HSD1的抑制劑，通過(guò)q RT-PCR法與免疫組化法檢測(cè)各組股骨頭標(biāo)本中11β-HSD1及PPARr，runx2，C/EBPα等基因的相對(duì)定量的表達(dá);
　　3.通過(guò)分離不同部位的成骨細(xì)胞，局部應(yīng)用11β-HSD

4、1的抑制劑進(jìn)行活性調(diào)節(jié)，觀察激素不同濃度下11β-HSD1的表達(dá)與活性改變，以及不同部位成骨細(xì)胞這種改變的差異，及對(duì)PPARr，runx2，C/EBPα等基因的相對(duì)定量的表達(dá)影響。
　　[結(jié)果]
　　1.應(yīng)用激素導(dǎo)致股骨頭骨小梁面積顯著減少，脂肪比例增加，符合早、中期SANFH模型特點(diǎn)，可應(yīng)用于下一步實(shí)驗(yàn)研究。
　　2.激素的全身應(yīng)用后，出現(xiàn)股骨頭脂肪比例增高。11β-HSD1表達(dá)隨之增高，伴隨其增高的有PPARr，C

5、/EBPa等基因，而runx2則表達(dá)減少。全身應(yīng)用11β-HSD1抑制劑后，runx2的表達(dá)有所下降，PPARr、C/EBPa、11β-HSD1表達(dá)有所上升，以PPARr上升為主?？梢?jiàn)GC通過(guò)11β-HSD1的調(diào)節(jié)可能主要影響了成骨與成脂的分化過(guò)程，并對(duì)后者的影響更大。
　　3.分別取自顱骨、股骨頭部位的成骨細(xì)胞對(duì)不同濃度糖皮質(zhì)激素反應(yīng)呈現(xiàn)出差異性，加入11β-HSD1抑制劑后，這種差異會(huì)出現(xiàn)減少傾向。
　　[結(jié)論]