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文檔簡(jiǎn)介
1、目的: 建立大鼠激素性股骨頭壞死正常負(fù)重和超負(fù)重模型,通過(guò)對(duì)于使用激素后不同時(shí)段的大鼠股骨頭病理、免疫組織化學(xué)、生物力學(xué)特性等方面探究激素性股骨頭壞死的發(fā)病機(jī)理。 方法: 4月齡健康Wistar大鼠45只,雌雄各半,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機(jī)分成兩組:實(shí)驗(yàn)組20只,對(duì)照組20只,保留正常鼠5只。精確稱重后,兩組大鼠分別臀肌注射地塞米松磷酸鈉(20mg/kg),每周1次,共計(jì)8周。實(shí)驗(yàn)組大鼠,置于跑步機(jī)中,以1km/h速
2、度勻速跑動(dòng),每次30min,每周2次,以形成股骨頭壞死超負(fù)重模型,跑動(dòng)后,正常籠中飼養(yǎng),自由進(jìn)食飲水。對(duì)照組大鼠,生理狀態(tài)下正常負(fù)重,正常籠中飼養(yǎng),自由進(jìn)食飲水。分別于2周、4周、6周、8周處死大鼠,取左側(cè)股骨頭標(biāo)本,于EnduraTEC ELF3200生物力學(xué)材料動(dòng)態(tài)力學(xué)性能測(cè)試系統(tǒng)行壓力測(cè)定,Wintest軟件自動(dòng)記錄下,累計(jì)時(shí)間、掃描時(shí)間、位移、負(fù)荷、軸向理論位移,用Origin7.0擬合形變—壓力曲線,計(jì)算樣本縱向最大位移、剛度
3、、壓縮過(guò)程能量吸收等生物力學(xué)參數(shù):取右側(cè)股骨頭標(biāo)本,常規(guī)HE染色以及免疫組織化學(xué)法Bcl-2和MMP-1染色,于MoticBA400型顯微鏡光學(xué)顯微鏡下觀察組織變化,并用Image-Pro Plus 5.1圖像分析系統(tǒng)分別測(cè)得單位面積內(nèi)骨小梁面積、骨小梁寬度、脂肪細(xì)胞數(shù)量、最大脂肪直徑、每高倍視野單位面積下空泡陷窩率,等相關(guān)指標(biāo)。對(duì)上述力學(xué)、病理學(xué)指標(biāo)應(yīng)用SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)對(duì)比,對(duì)比2,4,6,8周,對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的差別,進(jìn)行分
4、析。 結(jié)果: 實(shí)驗(yàn)組中各個(gè)時(shí)期股骨頭骨小梁寬度、剛度低于同期生理負(fù)重組,空骨陷窩數(shù)、單位視野內(nèi)骨小梁面積百分率、最大形變、壓縮能量吸收均高于同期生理負(fù)重組(P<0.05);實(shí)驗(yàn)組中各個(gè)時(shí)期軟骨細(xì)胞MMP-1和Bcl-2的表達(dá)量,均高于同期生理負(fù)重組(P<0.05);而單位面積內(nèi)脂肪細(xì)胞數(shù)量、最大脂肪直徑對(duì)比同期實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,未見(jiàn)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),而各時(shí)期組間,均有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。
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