魚藤酮對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)和空間學(xué)習(xí)記憶能力的影響.pdf

1、帕金森病(Parkinson's disease，PD)是一種常見(jiàn)的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病。隨著研究的深入，PD不再認(rèn)為是僅僅在黑質(zhì)—紋狀體系統(tǒng)發(fā)生了病變，而是一個(gè)影響周圍神經(jīng)系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)多個(gè)核團(tuán)的疾病。PD患者的認(rèn)知能力受損的發(fā)生率高達(dá)84％。
　　迄今為止，PD的病因仍未完全闡明，盡管遺傳和環(huán)境因素都起作用，但是90％以上的PD病人是散發(fā)性的。流行病學(xué)研究提示，環(huán)境因素與PD發(fā)病密切相關(guān)，長(zhǎng)期接觸農(nóng)藥的人群，PD的發(fā)病率較高

2、。魚藤酮是一種常用的除草劑和殺蟲(chóng)劑，能夠通過(guò)血腦屏障，通過(guò)抑制線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅰ的活性，從而導(dǎo)致黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的能量合成障礙，進(jìn)而引起神經(jīng)元的死亡。因此，魚藤酮被用于PD模型的制備。與其他的PD動(dòng)物模型相比，魚藤酮制備的PD模型具有明顯的優(yōu)勢(shì)，它能夠模擬PD的病理性特征變化，包括黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元數(shù)目的降低和殘存神經(jīng)元內(nèi)的alpha-突觸核蛋白的聚集。
　　目前，對(duì)魚藤酮制備的PD模型的研究，多集中在黑質(zhì)—紋狀體系統(tǒng)的功能改

3、變上，對(duì)其空間學(xué)習(xí)和記憶能力的改變尚未見(jiàn)報(bào)道。為了觀察PD中認(rèn)知功能的改變并初步探討其機(jī)制，本實(shí)驗(yàn)選用12月齡的C57BL/6小鼠進(jìn)行魚藤酮灌胃處理，動(dòng)物分為對(duì)照組，魚藤酮處理3月組和處理1月組，應(yīng)用免疫熒光和硫酸素T染色法觀察黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元數(shù)目的改變和神經(jīng)元內(nèi)alpha-突觸核蛋白聚集的情況，應(yīng)用轉(zhuǎn)棒法觀察小鼠運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)能力的改變，應(yīng)用Morris水迷宮評(píng)價(jià)小鼠空間學(xué)習(xí)與記憶能力的改變，同時(shí)通過(guò)免疫熒光雙標(biāo)的方法標(biāo)記海馬神經(jīng)元的增殖

4、細(xì)胞核抗原和微管相關(guān)蛋白，反映海馬未成熟神經(jīng)元的變化。研究結(jié)果如下:
　　1.在魚藤酮處理3月組，小鼠黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元數(shù)目減少24％，與對(duì)照組相比，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);同時(shí)多巴胺能神經(jīng)元內(nèi)出現(xiàn)明顯的alpha-突觸核蛋白的聚集。而魚藤酮處理1月組的小鼠未觀察到明顯變化。
　　2.在魚藤酮處理3月組，小鼠在轉(zhuǎn)棒上的停留時(shí)間降低了35％，與對(duì)照組相比，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。而魚藤酮處理1月組的小鼠未觀

5、察到改變。
　　3.魚藤酮處理3月組的小鼠逃避潛伏期明顯縮短，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。魚藤酮處理1月組的小鼠逃避潛伏期雖然有延長(zhǎng)趨勢(shì)，但與對(duì)照組相比，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　4.在水迷宮實(shí)驗(yàn)的第5天，魚藤酮處理3月組小鼠到原平臺(tái)位置的平均距離和在相對(duì)象限的時(shí)間分別縮短16.0％和34.5％(P＜0.05)，穿越平臺(tái)的次數(shù)和在訓(xùn)練象限的時(shí)間分別增加144％和33.4％(P＜0.05)。在水迷宮實(shí)驗(yàn)的第

6、7天，到達(dá)原平臺(tái)位置的時(shí)間、到原平臺(tái)位置的平均距離和在相對(duì)象限的時(shí)間分別減少54.9％、22.2％和37.3％(P＜0.05)，在訓(xùn)練象限的時(shí)間增加41.4％(P＜0.05)。這表明魚藤酮處理3月組的小鼠對(duì)平臺(tái)位置的記憶能力增強(qiáng)。
　　5.在水迷宮實(shí)驗(yàn)的第5天，魚藤酮處理1月組的小鼠到原平臺(tái)位置的平均距離、在相對(duì)象限的停留時(shí)間、穿越原平臺(tái)位置的次數(shù)和在訓(xùn)練象限的時(shí)間均未檢測(cè)出變化。然而，在第7天時(shí)，到原平臺(tái)位置的平均距離延長(zhǎng)19.

7、8％(P＜0.05)，在訓(xùn)練象限中停留時(shí)間百分比降低26.4％(P＜0.05)。這表明魚藤酮處理1個(gè)月的小鼠記憶能力受到損害。
　　6.在魚藤酮處理3月組和1月組，增殖細(xì)胞核抗原和微管相關(guān)蛋白對(duì)海馬未成熟神經(jīng)元的熒光雙標(biāo)記染色呈弱陽(yáng)性，與對(duì)照組相比，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　本實(shí)驗(yàn)證實(shí)，魚藤酮處理3月組的小鼠出現(xiàn)了PD相關(guān)的病理學(xué)和行為學(xué)改變，黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元數(shù)目減少和神經(jīng)元內(nèi)alpha-突觸核蛋白的聚集，同時(shí)出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)能