EGCG對(duì)鉛暴露小鼠學(xué)習(xí)記憶能力及海馬組織RAGE蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、目的:
　　用表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯（epigallocatechin gallate, EGCG）對(duì)鉛致阿爾茨海默病樣病變（Alzheimer’s disease, AD）小鼠進(jìn)行干預(yù)，觀察EGCG對(duì)小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力、海馬組織抗氧化酶活性、RAGE和Aβ蛋白表達(dá)的影響，探討EGCG對(duì)鉛致AD樣病變小鼠神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制。
　　方法:
　　取21天斷乳的健康清潔級(jí)C57BL/6雄性小鼠50只，按照體重隨機(jī)分為5組：

2、對(duì)照組、染鉛模型組、低（Pb+1.5 mg/kg EGCG）、中（Pb+3.0 mg/kg EGCG）、高（Pb+4.5 mg/kg EGCG）劑量干預(yù)組。染鉛模型組和干預(yù)組以自由飲水的形式飲用0.2％的醋酸鉛水溶液，對(duì)照組飲用去離子水，持續(xù)喂養(yǎng)8周進(jìn)行鉛染毒。染毒結(jié)束后，采用不同濃度的EGCG溶液對(duì)干預(yù)組小鼠等體積灌胃4周用于實(shí)驗(yàn)，而對(duì)照組和染鉛模型組采用生理鹽水進(jìn)行灌胃，每4周測(cè)量小鼠體重。干預(yù)結(jié)束后，進(jìn)行 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)。

3、水迷宮結(jié)束后次日，將小鼠麻醉后以摘眼球法采集全血，在冰上迅速剝離腦組織并取出海馬。用石墨爐原子吸收光譜儀測(cè)定血鉛含量；用相應(yīng)試劑盒分別測(cè)定海馬組織抗氧化物酶活性和丙二醛（malondialdehvde，MDA）含量；采用Western blot分析海馬組織高級(jí)糖基化終末產(chǎn)物受體（the receptor for advanced glycation end products, RAGE）蛋白表達(dá)水平；ELISA試劑盒測(cè)定海馬組織Aβ1-

4、40、Aβ1-42含量。
　　結(jié)果:
　　體重結(jié)果顯示：在第7周齡和第11周齡，染鉛模型組、不同劑量干預(yù)組與對(duì)照組相比，體重明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；用EGCG干預(yù)4周后，中、高劑量干預(yù)組體重高于染鉛模型組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　水迷宮結(jié)果：染鉛模型組平均逃避潛伏期高于對(duì)照組，中、高劑量干預(yù)組低于染鉛模型組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。第6天，染鉛模型組穿越平臺(tái)次數(shù)低于對(duì)

5、照組；中、高劑量干預(yù)組高于染鉛模型組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　血鉛含量：染鉛模型組和不同劑量干預(yù)組高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），不同劑量干預(yù)組與染鉛模型組比較，血鉛含量降低，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　抗氧化酶活性結(jié)果顯示：染鉛模型組、低劑量干預(yù)組與對(duì)照組比較，總超氧化物歧化酶( total superoxide dismutase, T-SOD)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（gluta

6、thione peroxidase，GSH-PX）抗氧化酶活性顯著降低，MDA含量明顯升高（P<0.05），中、高劑量EGCG干預(yù)組酶活性高于染鉛模型組，MDA含量明顯降低（P<0.05）。
　　Western blot結(jié)果顯示：染鉛模型組RAGE蛋白表達(dá)最高，空白對(duì)照組最低，干預(yù)組中隨著干預(yù)劑量的增加，表達(dá)有下降趨勢(shì)；不同劑量干預(yù)組蛋白表達(dá)低于染鉛模型組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　ELISA測(cè)量Aβ1-4

7、0、Aβ1-42含量結(jié)果顯示：染鉛模型組Aβ1-40、Aβ1-42含量最高，與對(duì)照組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；中、高劑量干預(yù)組低于染鉛模型組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論:
　　1.鉛暴露可使小鼠血鉛含量升高，延緩體重增長(zhǎng)，損傷小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力。鉛暴露還可降低海馬組織抗氧化酶活性，增加Aβ1-40、Aβ1-42蛋白含量和RAGE蛋白表達(dá)量。
　　2. EGCG干預(yù)可拮抗鉛暴露引起的小