母體孕期低水平鉛暴露對(duì)子代學(xué)習(xí)記憶的影響及其與海馬膠質(zhì)原纖維酸性蛋白關(guān)系的研究.pdf

1、目的：鉛是一種常見(jiàn)的有害重金屬，影響人體多個(gè)器官系統(tǒng)的功能，尤其是對(duì)嬰幼兒和兒童的中樞神經(jīng)系統(tǒng)的損害更為嚴(yán)重。隨著作業(yè)環(huán)境中保護(hù)條件的提高，高濃度的鉛污染造成的職業(yè)性鉛中毒病例逐漸減少，而公害性(污染主要來(lái)自鉛的生產(chǎn)和加工業(yè)，含四乙基鉛動(dòng)力汽油尾氣的排放，含鉛顏料、油漆等的廣泛使用等)、生活性(污染主要來(lái)自油漆家具、塑料制品、化妝品、染發(fā)劑、皮蛋等)、藥源性和母源性等低濃度鉛中毒正在逐漸增多。尤其是母源性鉛中毒，因?yàn)槠潆[蔽性和傳遞性，危

2、害日益嚴(yán)重，已經(jīng)受到人們的高度關(guān)注。兒童鉛中毒有很多是母親孕期一般劑量鉛暴露后，鉛在胎盤富集，并通過(guò)胎盤屏障，穿越胎兒血-腦屏障，在胎兒的體內(nèi)尤其是胎兒的腦皮層和海馬蓄積造成的。有研究表明鉛的濃度依次是，胎兒的腦皮層和海馬＞臍帶＞胎盤＞母體，胎兒體內(nèi)的鉛濃度甚至是母體的幾倍。而海馬是公認(rèn)的學(xué)習(xí)記憶神經(jīng)活動(dòng)產(chǎn)生的部位，所以母體孕期鉛暴露對(duì)孩子出生后的學(xué)習(xí)記憶等智力活動(dòng)，損害更為嚴(yán)重。 星形膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中最大量、最重要的成

3、分之一。星形膠質(zhì)細(xì)胞的最大特征是其胞漿內(nèi)含有膠質(zhì)纖維酸性蛋白(Glialfibrillaryacidicprotein，GFAP)。近年的研究發(fā)現(xiàn)星形膠質(zhì)細(xì)胞具有很多復(fù)雜的功能，可能參與了中樞神經(jīng)系統(tǒng)的許多高級(jí)功能，包括學(xué)習(xí)和記憶。有研究顯示星形膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)鉛敏感，認(rèn)為鉛可能是先損害星形膠質(zhì)細(xì)胞，進(jìn)而損害內(nèi)皮細(xì)胞，透過(guò)血-腦屏障，在腦皮層和海馬大量蓄積，進(jìn)一步損害膠質(zhì)細(xì)胞(90％為星形膠質(zhì)細(xì)胞)和神經(jīng)元，最終損害腦功能的。 本研究

4、通過(guò)建立母鼠孕期鉛暴露模型，獲得仔鼠作為觀察對(duì)象，檢測(cè)其組織鉛濃度，測(cè)定其學(xué)習(xí)記憶能力，檢測(cè)星形膠質(zhì)細(xì)胞及其標(biāo)志蛋白GFAP，在蛋白及基因轉(zhuǎn)錄水平的變化規(guī)律。揭示孕期母體低水平鉛后子代學(xué)習(xí)記憶能力變化，與星形膠質(zhì)細(xì)胞及其標(biāo)志蛋白GFAP表達(dá)變化之間的關(guān)系，對(duì)鉛的神經(jīng)毒性作用機(jī)制進(jìn)行探討。 方法1孕鼠隨機(jī)分為4組，自懷孕第1天起3個(gè)處理組分別給予醋酸鉛含量為125、250、500mg/L的飲水，對(duì)照組給予不含鉛的雙重蒸餾水。

5、 2采用流動(dòng)注射氫化物發(fā)生-原子吸收光譜法測(cè)定仔鼠血鉛、腦海馬組織鉛含量。 3以避暗穿梭箱實(shí)驗(yàn)、Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)測(cè)定仔鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。 4免疫組織化學(xué)技術(shù)、原位雜交技術(shù)結(jié)合圖像分析系統(tǒng)，檢測(cè)出生仔鼠海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞中GFAP蛋白及其mRNA的變化情況，在蛋白表達(dá)和基因轉(zhuǎn)錄水平揭示鉛對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞的影響。 結(jié)果1各處理組的1、21日齡仔鼠血鉛、腦海馬組織鉛水平明顯高于對(duì)照組仔鼠(P＜0.05)，至60日齡

6、已無(wú)顯著性差異。2各處理組21、60日齡仔鼠連續(xù)4天訓(xùn)練期間，第2、3、4天潛伏期均高于同期低對(duì)照組仔鼠(P＜0.05)。 3各處理組21、60日齡仔鼠連續(xù)5天訓(xùn)練期間，主動(dòng)回避次數(shù)(TOIA)低于同期對(duì)照組仔鼠(P＜0.05)，主動(dòng)回避潛伏期(LOIA)、被動(dòng)回避潛伏期(LOPA)高于同期對(duì)照組仔鼠(P＜0.05)。 4各處理組海馬CA1區(qū)輻射層GFAP蛋白陽(yáng)性細(xì)胞以及GFAPmRNA陽(yáng)性細(xì)胞的平均數(shù)密度，與對(duì)照組相比