鼻咽癌紫杉醇耐藥細胞系的生物學特性及多藥耐藥性檢測.pdf

1、目的：對本實驗室建立的人鼻咽癌紫杉醇耐藥細胞株(CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol)的生物學特性進行觀察，檢測這兩株細胞系是否具有多藥耐藥性以及常見多藥耐藥基因MDR-1的表達情況。
　　 方法：采用大劑量沖擊和逐步增加劑量相結(jié)合的方法，建立了兩株鼻咽癌紫杉醇耐藥細胞株(CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol)，分別比較了這兩株耐藥細胞與其親本細胞的形態(tài)、生長曲線、倍增時間的差異；運用流式細胞儀檢測了其細胞周

2、期變化；集落形成實驗檢測了它們對紫杉醇、順鉑、5-氟尿嘧啶、甲氨蝶呤和博來霉素五種化療藥的敏感性；使用real time RT-PCR比較了親本細胞與耐藥細胞MDR-1表達差異。
　　 結(jié)果：兩株細胞系CNE-1/Taxol和HNE-2/Taxol的細胞大小及形態(tài)與親本細胞不一致，增殖速度減慢，倍增期延長，G2/M期細胞比例增多。集落形成實驗結(jié)果顯示CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol對紫杉醇的敏感性顯著低于其親本細胞

3、CNE-1和HNE-2，前兩者的IC50值分別為9.59±0.26、7.62±0.21，而后兩者的IC50分別為1.14±0.08、0.92±0.08；同時，CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol對5-氟尿嘧啶和甲氨蝶呤的敏感性也顯著低于其親本細胞CNE-1和HNE-2，但耐藥指數(shù)顯著低于對紫杉醇的敏感性。然而，CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol對順鉑的敏感性顯著高于其親本細胞CNE-1和HNE-2，前兩者的IC50

4、值分別為95.4±9.2、158.3±5.6，后兩者的IC50值分別為239.2±10.7、187.6±4.5；與親本細胞系比較，耐藥細胞系對博萊霉素的敏感性沒有變化(p＞0.05)；定量RT-PCR的結(jié)果顯示MDR-1在兩株親本細胞中表達均很低，且在耐藥細胞中表達無明顯增高，反而降低。
　　 結(jié)論：CNE-1/Taxol、HNE-2/Taxol是兩株對紫杉醇耐藥的細胞株，是研究紫杉醇耐藥機制的重要實驗?zāi)Ｐ?；兩株耐藥細胞?-氟