TRF1、TRF2表達(dá)及端粒穩(wěn)定性在As-,2-O-,3-誘導(dǎo)MGC803細(xì)胞凋亡和染色體畸變中的作用.pdf

1、1.AS2O3誘導(dǎo)MGC803細(xì)胞凋亡中TRF1、TRF2蛋白表達(dá)及端粒穩(wěn)定性的作用　　目的：分析三氧化二砷(As2O3)對(duì)人胃癌MGC803細(xì)胞端粒重復(fù)序列結(jié)合因子1、2(TRF1、TRF2)表達(dá)及端粒穩(wěn)定性的影響，探討As2O3誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的機(jī)理。　　方法：體外培養(yǎng)MGC803細(xì)胞，MTT比色實(shí)驗(yàn)分析As2O3對(duì)MGC803細(xì)胞增殖抑制作用，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)MGC803細(xì)胞凋亡，進(jìn)行染色體端—端融合分析及Westernblot檢測(cè)

2、TRF1、TRF2蛋白表達(dá)?！　〗Y(jié)果：MTT法顯示As2O3對(duì)人胃癌MGC803細(xì)胞有明顯地抑制作用，且呈時(shí)間、劑量依賴關(guān)系。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)出現(xiàn)典型的凋亡峰，并隨As2O3濃度增加和作用時(shí)間延長(zhǎng)而增高，對(duì)照組未見此改變。染色體端—端融合分析顯示5μmol·L-1AS2O3處理MGC803細(xì)胞48h染色體融和率明顯高于對(duì)照組。WesternBlot分析結(jié)果表明TRF1在5μmol·L-1As2O3處理MGC803細(xì)胞48h后，表達(dá)上升，

3、而TRF2表達(dá)下降?！　〗Y(jié)論：1.As2O3(1.25-40pmol·L-1)可明顯抑制MGC803細(xì)胞的生長(zhǎng)和誘導(dǎo)其凋亡，與藥物濃度及作用時(shí)間均具有明顯依賴關(guān)系。2.As2O3可能通過下調(diào)TRF2蛋白表達(dá)、上調(diào)TRF1蛋白表達(dá)及使染色體端—端融合，誘導(dǎo)MGC803細(xì)胞凋亡。　　2.TRRF1、TRF2蛋白在砷致MGC803細(xì)胞染色體畸變中的作用　　目的：分析端粒重復(fù)序列結(jié)合因子1、2(TRF1、TRF2)在砷致MGC803細(xì)胞染

4、色體畸變中的作用，探討砷致細(xì)胞增殖及癌變的可能機(jī)理。　　方法：以人MGC803細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，采用染色體分析檢測(cè)畸變率及有絲分裂指數(shù)(MI)，Westernblot檢測(cè)TRF1、TRF2、PCNA蛋白表達(dá)。　　結(jié)果：0.625μMAs2O3處理MGC803細(xì)胞4周后，MI、PCNA蛋白表達(dá)均高于對(duì)照組，顯示細(xì)胞分裂增殖增強(qiáng)；染色體分析顯示畸變率明顯高于對(duì)照組，畸變類型以融合染色體(即雙或多著絲粒、環(huán)形染色體)為主；同時(shí)，Wester