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文檔簡介
1、目的:
研究順鉑對卵巢癌細胞HO-8910中BMI-1、P16INK4A的表達影響,初步分析這兩種基因與順鉑誘導的卵巢癌細胞凋亡的關系。
方法:
1.培養(yǎng)對數生長期人卵巢癌細胞株HO-8910,加入不同濃度梯度的順鉑,分別干預24h、48h、72h后采用MTT法檢測細胞的抑制率。
2.培養(yǎng)對數生長期人卵巢癌細胞株HO-8910,加入不同濃度的順鉑,干預48h后采用TUNEL染色法檢測細胞凋亡情況。
2、
3.培養(yǎng)對數生長期人卵巢癌細胞株HO-8910,加入一定濃度的順鉑,干預48h后采用Western blotting技術檢測細胞中BMI-1、P16INK4A蛋白的相對表達量。
4.培養(yǎng)對數生長期人卵巢癌細胞株HO-8910,加入一定濃度的順鉑,干預48h后采用Real-time PCR技術檢測細胞中BMI-1mRNA、P16INK4A mRNA的相對表達量。
結果:
1.在順鉑濃度為0.312
3、5ug/ml~10ug/ml的范圍內能夠抑制卵巢癌細胞HO-8910增殖,其抑制作用隨著藥物濃度的增加及時間的延長而增強(P<0.05)。
2.TUNEL試驗證實順鉑能夠誘導卵巢癌細胞HO-8910凋亡,凋亡陽性信號隨藥物濃度的增加而增強,提示凋亡細胞數目隨順鉑濃度的增加而增加。
3.順鉑處理卵巢癌細胞HO-8910細胞48h后,BMI-1蛋白相對表達量及P16INK4A蛋白相對表達量均降低,與對照組相比P<0.05
4、,差異有統(tǒng)計學意義。
4.順鉑干預卵巢癌細胞HO-8910細胞48h后,BMI-1 mRNA相對表達量及P16INK4A mRNA相對表達量均降低,與對照組相比P<0.05,差異有統(tǒng)計學意義。
結論:
1、在一定濃度范圍內,順鉑能夠抑制卵巢癌細胞HO-8910增殖并能誘導其凋亡,其抑制作用具有濃度和時間依賴性。
2、BMI-1、P16 INK4A在順鉑誘導的卵巢癌細胞HO-8910凋亡中表達下調,
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