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1、病理切片中各種蠕蟲(chóng)的鑒定是臨床病理診斷中常見(jiàn)的難題,其原因是到目前為止針對(duì)不同蟲(chóng)種的組織形態(tài)特征未見(jiàn)有系統(tǒng)的形態(tài)描述或圖譜分析,也未建立一種實(shí)用于臨床鑒別蟲(chóng)種的方法。本研究對(duì)(肺吸蟲(chóng)、豬囊蟲(chóng)和曼氏裂頭蚴)此三種蠕蟲(chóng)病理組織切片進(jìn)行了形態(tài)學(xué)比較分析和基因檢測(cè)。研究方法:收集多個(gè)不同種蠕蟲(chóng)的石蠟切片標(biāo)本(來(lái)源于動(dòng)物或臨床患者)和12個(gè)臨床病理切片標(biāo)本(來(lái)源于疑似感染此三種蠕蟲(chóng)的臨床患者);在光學(xué)鏡下比較觀察和分析已知肺吸蟲(chóng)、豬囊蟲(chóng)和裂頭蚴的
2、組織結(jié)構(gòu)相似性和特征性,闡述了蟲(chóng)體組織退變而呈現(xiàn)為不典型形態(tài)結(jié)構(gòu)的特征;根據(jù)此三種蠕蟲(chóng)的種特異性基因序列,設(shè)計(jì)相應(yīng)PCR引物檢測(cè)此三種蠕蟲(chóng)做種特異性,并探索了從組織內(nèi)蠕蟲(chóng)的病理白片、染色片和組化片中提取DNA的方法以及提取DNA所需的蟲(chóng)體組織量,最后檢測(cè)該方法是否實(shí)用于臨床切片標(biāo)本。結(jié)果顯示:①三種蠕蟲(chóng)和其他吸蟲(chóng)的網(wǎng)狀組織結(jié)構(gòu)和皮層具有相似性;三種蠕蟲(chóng)的特征性標(biāo)志,肺吸蟲(chóng)具有尖刀樣的皮棘、橢圓形的斷面和組織內(nèi)可見(jiàn)管腔器官及吸盤(pán),豬囊蟲(chóng)斷
3、面大且具有多個(gè)不規(guī)則囊腔,裂頭蚴斷面呈長(zhǎng)橢圓形可見(jiàn)大量石灰小體;退化變性后的蟲(chóng)體使其特征性結(jié)構(gòu)有不同程度地消失。②用肺吸蟲(chóng)(L12/R12和F3/B3)、裂頭蚴(F650/R800)和豬囊蟲(chóng)(F3/R7)的引物分別對(duì)此三種蠕蟲(chóng)、其他寄生蟲(chóng)、宿主組織進(jìn)行PCR擴(kuò)增后,在相應(yīng)的這三種蠕蟲(chóng)的泳道中有明顯的目的條帶,而其他寄生蟲(chóng)和宿主組織均未擴(kuò)增出條帶。③用改良蛋白酶K消化法提出DNA所需最小組織量:肺吸蟲(chóng)的為1.50mm2×10μm;曼氏裂頭
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