DNA疫苗微球給藥系統(tǒng)的研究.pdf

1、為了達(dá)到提高DNA疫苗的細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)效率、提高免疫效果,降低給藥劑量;增加給藥途徑,誘導(dǎo)粘膜免疫的目的,該文設(shè)計(jì)采用生物可降解材料海藻酸鈉、PLGA為載體,以口蹄疫DNA疫苗為模型藥物,制備了DNA疫苗海藻酸鈉微球和PLGA微球,并對(duì)微球的處方、工藝、釋放特性及影響因素、理化特性、藥物穩(wěn)定性、免疫增強(qiáng)機(jī)理、體內(nèi)外免疫效果、細(xì)胞毒性和組織刺激性等進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究.該文采用新型的乳化離子-交聯(lián)法制備了口蹄疫DNA疫苗海藻酸鈉微球,解決了傳

2、統(tǒng)的海藻酸鈉微球制備方法的粒徑大、不易控制的難題.該法無(wú)需有機(jī)溶劑,制備條件溫和,有利于保持DNA疫苗結(jié)構(gòu)和生物活性的穩(wěn)定性.試驗(yàn)設(shè)計(jì)采用均勻設(shè)計(jì)法,考察制各工藝條件對(duì)粒徑大小、包封率的影響.統(tǒng)計(jì)分析表明,攪拌速度、MC的用量對(duì)微球粒徑大小的影響顯著(P<0.01);理論載藥量、攪拌速度對(duì)藥物包封率的影響顯著(P<0.01).微球的體外釋放試驗(yàn)表明,殼聚糖的固化比例高低是影響微球釋放速率的主要因素:未殼聚糖固化的微球釋放較快;殼聚糖固化

3、后可顯著延緩微球的釋放,固化比例越高,釋藥速率越慢.載藥量的高低、釋放介質(zhì)的種類對(duì)微球釋放特性的影響較小.電泳分析表明,制備工藝、冷凍干燥工藝較好地保持了DNA疫苗的穩(wěn)定性.為了有利于微球產(chǎn)業(yè)化,該文進(jìn)一步采用噴霧干燥法制備了DNA疫苗海藻酸鈉微球,該方法具有以下優(yōu)點(diǎn):無(wú)有機(jī)溶劑殘留、制各工藝簡(jiǎn)便、方便產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)應(yīng)用.試驗(yàn)設(shè)計(jì)采用正交設(shè)計(jì)法,對(duì)影響微球的粒徑大小的處方工藝因素進(jìn)行了考察并對(duì)體外釋放特性及影響因素進(jìn)行了研究.結(jié)果表明,噴嘴