遠緣鏈球菌單菌種生物膜的動態(tài)變化及胞外多糖作用的實驗研究.pdf

1、V792956四川博士學(xué)學(xué)校代碼：10610學(xué)號：大學(xué)位論文遠緣鏈球菌單菌種生物膜的動態(tài)變化題目及胞外多糖作用的實驗研究作專者胡濤業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師姓名周學(xué)東教授二Oo五年五月四川大學(xué)華西口腔醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文遠緣鏈球菌單菌種生物膜的動態(tài)變化及胞外多糖作用的實驗研究博士研究生：胡濤導(dǎo)師：周學(xué)東教授中文摘要目的：動態(tài)觀察遠緣鏈球菌單菌種生物膜的形成、結(jié)構(gòu)以及胞外多糖在生物膜中的分布，比較不同培養(yǎng)時間和蔗糖濃度下遠緣鏈球菌在生物膜黏附狀

2、態(tài)下和浮游狀態(tài)下產(chǎn)生水溶性胞外多糖和水不溶性胞外多糖量的差異，分析在生物膜不同形成階段多糖的作用。方法：1采用微生物培養(yǎng)技術(shù)將遠緣鏈球菌在玻璃片上形成單菌種生物膜，用熒光染料BOBO一3、Fluorescein、BODIPY和Calcofluor進行熒光染色，激光共聚焦掃描顯微鏡分別觀察l、3、4、6、9、12、16和24小時的生物膜結(jié)構(gòu)和其中胞外多糖的分布。2將遠緣鏈球菌分別進行靜置培養(yǎng)和搖動培養(yǎng)，以得到黏附狀態(tài)和浮游狀態(tài)下的遠緣鏈球

3、菌，葸酮法測量兩種狀態(tài)下不同培養(yǎng)時間和蔗糖底物濃度下細菌產(chǎn)生的胞外多糖的差異。結(jié)果：1遠緣鏈球菌能夠在玻璃表面黏附形成致密的生物膜，多糖的黏附和聚集是生物膜初始黏附和發(fā)展的前提，在此階段存在細菌和多糖的消除和重建過程：成熟生物膜的特征是形成大量微菌落和溝壑間隙，臨近黏附表面的生物膜基底部位細菌密度較低，而中部則較致密。在生物膜發(fā)展和成熟期，胞外多糖分布與菌落中細菌的分布基本一致，提示遠緣鏈球菌依靠其產(chǎn)生的胞外多糖聚集形成了生物膜。2生物