血卟啉單甲醚光動(dòng)力治療鮮紅斑痣的臨床和基礎(chǔ)研究.pdf

1、第一部分光動(dòng)力、脈沖染料激光及強(qiáng)脈沖光治療鮮紅斑痣的臨床療效觀察
　　 目的：評(píng)價(jià)和比較光動(dòng)力(PDT)、脈沖染料激光(PDL)和強(qiáng)脈沖光(IPL)治療鮮紅斑痣的臨床療效。
　　 方法：PDT以血卟啉單甲醚為光敏劑,532nm連續(xù)激光為光源,PDL為595nm激光,IPL根據(jù)不同皮損選擇560nm,590nm或640nm的濾光片,回顧性總結(jié)和分析不同性別、皮損類型及皮損部位與三種治療的療效關(guān)系。
　　 結(jié)果：患者

2、總數(shù)共130例,其中PDT患者35例,PDL患者56例,IPL患者39例。三種治療組在性別、皮損類型及治療部位的構(gòu)成比上無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p分別為0.904、0.929及0.987)?？傮w療效PDT最高,其次為PDL,最后為IPL,三者的顯效率分別為為54.3％、33.9％和20.5％；不同性別之間三種治療的療效無(wú)顯著差異(p分別為0.225、0.821和0.145)；PDT組粉紅型療效明顯優(yōu)于紫紅型(p=0.021)和增厚型(p=0.02

3、6),紫紅型和增厚型之間療效無(wú)差異(p=0.068)；PDL組及IPL組三種皮損類型之間療效均無(wú)差異(PDL組p分別為0.226、0.400和0.946;IPL組p分別為0.803、0.095和0.069)；PDT和PDL組中頸部療效優(yōu)于面部(p分別為0.002和0.004),IPL組的療效無(wú)差異(p=0.097)。
　　 結(jié)論：PDT是治療鮮紅斑痣安全有效的方法,總體療效優(yōu)于PDL和IPL。
　　 第二部分血管內(nèi)皮細(xì)胞

4、和角質(zhì)形成細(xì)胞對(duì)血卟啉單甲醚吸收特性的研究
　　 目的：觀察和比較血管內(nèi)皮細(xì)胞(ECV304)和角質(zhì)形成細(xì)胞(HaCaT)對(duì)光敏劑血卟啉單甲醚(HMME)的吸收特性。
　　 方法：取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的ECV304和HaCaT分別與50、100、150、200、250μg/ml的HMME孵育,孵育時(shí)間為16h；再將150μg/ml的HMME分別與上述兩種細(xì)胞孵育,孵育時(shí)間分別為15min、30min、1h、3h、8h、12h、2

5、4h。激光掃描共聚焦顯微鏡檢測(cè)熒光強(qiáng)度。
　　 結(jié)果：濃度依賴性結(jié)果顯示ECV304的平均熒光強(qiáng)度分別為74.00、125.57、135.24、141.99、132.09；HaCaT的平均熒光強(qiáng)度分別為93.88、102.45、112.59、108.23、104.70。時(shí)間依賴性結(jié)果顯示ECV304的平均熒光強(qiáng)度分別為95.07、103.97、105.96、108.99、112.93、115.36、122.91；HaCaT的平均

6、熒光強(qiáng)度分別為104.25、106.60、108.72、113.75、117.66、114.90、118.14。
　　 結(jié)論：ECV304和HaCaT對(duì)HMME的吸收在一定濃度范圍和時(shí)間范圍內(nèi)均呈孵育濃度和孵育時(shí)間依賴性。
　　 第三部分血卟啉單甲醚在血管內(nèi)皮細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞中的定位及光動(dòng)力治療靶點(diǎn)的研究
　　 目的：探討血卟啉單甲醚(HMME)在血管內(nèi)皮細(xì)胞系ECV304和角質(zhì)形成細(xì)胞系HaCaT的亞細(xì)胞定位

7、及光動(dòng)力治療的作用靶點(diǎn)。
　　 方法：HMME與ECV304和HaCaT分別孵育1h和18h,熒光探針?lè)謩e標(biāo)記線粒體、核膜、細(xì)胞膜和過(guò)氧化物酶體,觀察不同時(shí)間點(diǎn)下HMME與細(xì)胞器的結(jié)合率；HMME與ECV304和HaCaT分別孵育20h,給予532nm連續(xù)激光照射,比較照光前后上述細(xì)胞器中HMME的熒光強(qiáng)度變化。
　　 結(jié)果：HMME與細(xì)胞器的結(jié)合率實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,ECV3041h組線粒體、核膜、細(xì)胞膜、過(guò)氧化物酶體HMM

8、E的結(jié)合率分別為1.18、0.72、0.95、0.68,18h組分別為1.35、0.83、0.73、0.91; HaCaT1h組分別為1.09、0.66、0.92、0.77,18h組分別為1.13、0.86、0.72、1.10。HMME在細(xì)胞器中的漂白率實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,ECV304分別為18.22％、10.77％、7.44％、8.56％,HaCaT分別為11.90％、5.02％、3.82％、8.90％。
　　 結(jié)論：ECV304