血卟啉單甲醚光動(dòng)力學(xué)療法治療實(shí)驗(yàn)性脈絡(luò)膜新生血管的初步研究.pdf

1、中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院碩士學(xué)位論文血卟啉單甲醚光動(dòng)力學(xué)療法治療實(shí)驗(yàn)性脈絡(luò)膜新生血管的初步研究姓名：范思均申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：激光醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：顧瑛20080605軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院碩士學(xué)位論文20min、40min、lh、2h、24h時(shí)迅速取材做冰凍切片，熒光顯微鏡下觀察，圖像處理軟件分析熒光強(qiáng)度并依此分級(jí)。另CNV模型大鼠分別用于HMME眼底造影和眼組織冰凍切片的熒光顯微鏡觀察。3建立CNV模型后1421d，CN

2、V模型鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組(C)和PDT治療組(T卜T6)。T卜T3組大鼠股靜脈注射tlMME15mg／kg后20rain，分別以400、600、1000mW／cm2功率密度，波長(zhǎng)630nm半導(dǎo)體激光照射90s，即能量密度分別為36、54、90J／cm2；T4T6組大鼠在給予HMME30mg／kg后，激光分別照射60、90、150s，即能量密度分別為36、54、90J／cm2。眼底光斑直徑皆為80010009m。治療后24h和7d行FF

3、A檢查和組織病理學(xué)檢查，治療后7d行脈絡(luò)膜平片的免疫組化檢查。結(jié)果：1FFA顯示光凝后3d視網(wǎng)膜水腫，7d水腫明顯減輕，晚期中央為低熒光，周?chē)@熒光素滲漏的強(qiáng)熒光，形成圓盤(pán)狀結(jié)構(gòu)，標(biāo)志CNV開(kāi)始形成。14d光斑形成圓盤(pán)狀結(jié)構(gòu)的強(qiáng)熒光滲漏，熒光滲漏強(qiáng)度增強(qiáng)，滲漏的光斑數(shù)增多。14d以后FFA檢查顯示光凝斑有熒光滲漏強(qiáng)度和熒光滲漏的激光斑數(shù)逐漸增加的趨勢(shì)。組織病理學(xué)光鏡觀察光凝后3d未見(jiàn)新生血管形成，7d在視網(wǎng)膜下形成早期的新生血管結(jié)構(gòu)。

4、14dCNV進(jìn)一步增殖，14d以后CNV的纖維血管狀態(tài)維持相對(duì)穩(wěn)定狀態(tài)。2Wistar大鼠注射HMME后3—5分鐘時(shí)脈絡(luò)膜，視網(wǎng)膜熒光均較強(qiáng)。20分鐘后背景熒光逐漸減弱，40分鐘后熒光明顯減弱，2小時(shí)后熒光基本消退。熒光顯微鏡下觀察眼球冰凍切片注射HMME后大鼠眼組織各部位隨時(shí)問(wèn)的推移的熒光強(qiáng)度變化逐漸減弱，24小時(shí)后各部位均未觀察到熒光。CNV模型鼠HMME造影5分鐘CNV處熒光不明顯，20分鐘可見(jiàn)CNV處熒光，20分鐘后背景熒光已減

5、弱，但CNV處熒光仍可見(jiàn)，CNV40分鐘后熒光減弱，1小時(shí)后熒光極弱至觀察不到。眼球冰凍切片5分鐘CNV組織中可見(jiàn)較強(qiáng)的紅色熒光，2040分鐘紅色熒光仍明顯可見(jiàn)，1小時(shí)后CNV組織中紅色熒光減弱，24小時(shí)后各部位包括CNV組織中都未觀察到熒光。3FFA顯示各治療參數(shù)的CNV閉合率不同，隨能量密度的增加和光敏劑劑量的增加而提高。組織病理學(xué)觀察PDT后24h除T1組外各組可見(jiàn)不同程度的CNV和脈絡(luò)膜毛細(xì)血管閉合：T2組視網(wǎng)膜毛細(xì)血管和脈絡(luò)膜