PGC-1α在細(xì)胞凋亡模型中的表達(dá)以及與JNK和P38細(xì)胞凋亡通路的關(guān)系.pdf

1、過氧化物酶體增殖物激活受體丫輔激活因子1α(peroxisome prol iferator-activatedreceptor-γ coactivator-1α，PGC-1α)是線粒體生物合成和呼吸的主要調(diào)節(jié)因子之一，PGC-1α能刺激線粒體的生物合成，維持線粒體的膜電位差，同時還可以誘導(dǎo)線粒體抗氧化酶的表達(dá)上調(diào)，從而能拮抗凋亡刺激因子誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。但是PGC-1α在退行性疾病中的作用還不是很清楚，而且與凋亡信號傳導(dǎo)通路之間的關(guān)系也

2、正處于研究當(dāng)中，因此，本論文主要探討PGC-1α在退行性疾病細(xì)胞模型中的表達(dá)以及與JNK和P38細(xì)胞凋亡通路的關(guān)系。 在魚藤酮誘導(dǎo)的的SH-SY5Y細(xì)胞的凋亡模型中，以0.1μM、0.5μM、1μM、5μM的魚藤酮處理42小時后，PGC-1α蛋白的表達(dá)隨魚藤酮濃度的增多呈現(xiàn)下調(diào)；以1μM的魚藤酮分別作用12h、24h、36h、42h、48h后，PGC-1α蛋白的表達(dá)隨魚藤酮作用時間的延長呈現(xiàn)下調(diào)。 在MPP<'+>誘導(dǎo)的

3、SH-SY5Y細(xì)胞凋亡模型中，PGc-1α基因和蛋白在5mM MPP<'+>作用3h和6h為表達(dá)上調(diào)，在21h表現(xiàn)為下調(diào)。 在MPP<'+>誘導(dǎo)的小腦顆粒原代培養(yǎng)的神經(jīng)元凋亡模型中，以25μM、50μM、75μM、100μM的MPP<'+>處理24小時后，PGC-1α蛋白的表達(dá)在50μM處理組表達(dá)上調(diào)達(dá)到高峰，在100μM處理組表達(dá)明顯下調(diào)。以100μM的MPP<'+>分別處理0.5h和1h，PGC-1α蛋白的表達(dá)出現(xiàn)了上調(diào)，在

4、16h和24h出現(xiàn)了明顯的下調(diào)。應(yīng)用Western blot的方法發(fā)現(xiàn)MPP<'+>處理小腦顆粒細(xì)胞后0.5h，磷酸化JNK和磷酸化p38均增高；這兩種激酶各自的抑制劑都可以濃度依賴性減少LDH的釋放，提示兩種激酶的激活參與了MPP<'+>誘導(dǎo)的小腦顆粒細(xì)胞的凋亡。在用MPP<'+>處理前2小時先預(yù)孵JNK和P38的抑制劑，16小時后用Western blot的方法檢測PGC-1α，相對于MPP<'+>處理組PGC-1α蛋白的表達(dá)呈現(xiàn)了

5、濃度依賴性的部分上調(diào)，結(jié)果提示誘導(dǎo)的PGC-1α蛋白下調(diào)很可能通過州K和P38通路介導(dǎo)的。綜合以上結(jié)果得出：(1)在魚藤酮和MPP<'+>誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞模型以及MPP<'+>誘導(dǎo)的原代培養(yǎng)的小腦顆粒細(xì)胞模型中，當(dāng)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯改變時，PGC-1α蛋白的表達(dá)也出現(xiàn)了下調(diào)。(2)MPP<'+>通過激活JNK和P38通路誘導(dǎo)了小腦顆粒原代培養(yǎng)神經(jīng)元的凋亡；JNK和P38的抑制劑可以拮抗MPP<'+>誘導(dǎo)的PGC-1α蛋白的表達(dá)下