P44-42MAPK及P38 MAPK在氯化鎘誘發(fā)腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞凋亡中作用的初步研究.pdf

1、該課題組一直致力于鎘內(nèi)分泌毒性的研究,并探討MAPKs在此過程中的作用.腎上腺皮質(zhì)是機(jī)體重要的內(nèi)分泌組織,我們在國內(nèi)外首先報(bào)道了鎘能夠誘導(dǎo)豚鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞凋亡,JNK可能參與了這一過程,但P44/42、P38是否參與這一過程,國內(nèi)外尚未見報(bào)道.因此探討P44/42、P38在鎘誘導(dǎo)豚鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞凋亡中的可能作用,對于全面深入了解鎘的腎上腺皮質(zhì)毒性及其機(jī)制有重要意義.研究目的:觀察氯化鎘對體外培養(yǎng)的豚鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞凋亡發(fā)生的影響,同

2、時(shí),觀察在此過程中,P44/42、P38 MAPK磷酸化水平的改變,以及轉(zhuǎn)錄因子c-Fos、c-Myc表達(dá)水平的改變.初步探討氯化鎘誘導(dǎo)腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制,為進(jìn)一步研究鎘的內(nèi)分泌毒性提供新的線索和理論依據(jù).材料和方法:選用體重在500g-600g之間的健康雄性豚鼠,建立原代培養(yǎng)的腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞研究體系,進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn):一、細(xì)胞凋亡的檢測:二、P44/42、P38 MAPK磷酸化水平的檢測:三、轉(zhuǎn)錄因子c-Fos、c-Myc表達(dá)水

3、平的檢測:結(jié)論:1、12.5μmol/L~200μmol/L氯化鎘在離體情況下呈劑量依賴和時(shí)間依賴的方式誘發(fā)豚鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞凋亡;2、12.5μmol/L~200μmol/L氯化鎘在離體情況下,不影響P44/42、P38蛋白總量,以劑量依賴和時(shí)間依賴的方式誘導(dǎo)豚鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞中兩者磷酸化水平升高,P44/42、p38磷酸化水平升高和凋亡發(fā)生的時(shí)間效應(yīng)等研究結(jié)果提示,P44/42MAPK、p38MAPK可能在氯化鎘誘導(dǎo)豚鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)