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1、 目的:長(zhǎng)期維生素B6(VB6)消化道給于腦癱模型幼鼠,觀察給藥后腦癱幼鼠學(xué)習(xí)記憶和運(yùn)動(dòng)功能障礙的改變及海馬CA3區(qū)突觸素(synaptophysin,SYN)的免疫表達(dá)。探討VB6對(duì)腦癱的作用及可能機(jī)理。 方法:14天齡Wistar大鼠72只,隨機(jī)分為空白對(duì)照組(CC,n=18)、假手術(shù)組(CS,n=18)、腦癱組(CM,n=18)和腦癱VB6處理組(CM+VB6,n=18),采用改良的Philip方法,建立缺血缺氧腦癱
2、模型(右側(cè)肢體偏癱)。四組均自由進(jìn)食(基礎(chǔ)飼料)和飲水,VB6劑量為7mg/kg。應(yīng)用Morriswatermazetest(MWMT)記錄尋找水下平臺(tái)逃避潛伏期(EL)和游泳距離(SD)檢測(cè)各組大鼠學(xué)習(xí)記憶功能的變化;應(yīng)用Beamwalkingtest(BWT)記錄latency(大鼠通過(guò)橫竿的潛伏期),包括latencyofbeam100cm×784mm2,100cm×144mm2and100cm×25mm2檢測(cè)各組大鼠運(yùn)動(dòng)平衡和協(xié)
3、調(diào)功能的變化;應(yīng)用Footprintpatterntest(FPT)記錄左/右側(cè)步長(zhǎng)(1eft/rightstridelength,LSL,RSL),前肢間距離(front-basewidth,F(xiàn)BW),后肢間距離(hind-basewidth,HBW)及左/右側(cè)前、后爪心間距離,包括(distancefromleft/rightfrontfootprint/hindfootprintoverlap,DLFHFO,DRFHFO)檢測(cè)各組
4、大鼠步態(tài)的變化;應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)各組大鼠海馬CA3區(qū)SYN的免疫表達(dá)。依給藥天數(shù),各組動(dòng)物分別于給藥后第5(6只)、10(6只)、20(6只)天分三批處死。 結(jié)果:1.MWMT:第12-20天CM+VB6組EL、SD較CM組縮短(P<0.05)。第19、20天CM+VB6組EL與CC組無(wú)顯著性差異(P>0.05)。第20天CM+VB6組SD與CC組無(wú)顯著性差異(P>0.05)。第12-20天CS組EL、SD與CC組無(wú)顯著
5、性差異(P>0.05)。2.BWT:第3-9天CM+VB6組latencyofbeam100cm×784mm2,100cm×144mm2and100cm×25mm2均較CM組減小(P<0.05)。第9天CM+VB6組latencyofbeam100cm×784mm2,100cm×144mm2與CC組均無(wú)顯著性差異(P>0.05),但latencyofbeam100cm×25mm2仍較CC組延長(zhǎng)(P<0.05),說(shuō)明隨著給藥天數(shù)的延長(zhǎng),在
6、簡(jiǎn)單任務(wù)中大鼠運(yùn)動(dòng)平衡和協(xié)調(diào)功能日趨正常,但隨著測(cè)試任務(wù)難度增加后未能完全恢復(fù)正常。第1-9天CS組與CC組無(wú)顯著性差異(P>0.05),說(shuō)明手術(shù)對(duì)大鼠運(yùn)動(dòng)的平衡和協(xié)調(diào)功能無(wú)影響。3.FPT:CM+VB6組和CM組比較,第5-9天RSL增大(P<0.05),第7-9天HBW、DRFHFO減小(P<0.05),說(shuō)明CM+VB6組大鼠步態(tài)異常改善。CM+VB6組和CC組比較,第1-9天RSL減小,HBWD、RFHFO增大(P<0.05),說(shuō)
7、明CM+VB6組大鼠步態(tài)仍未恢復(fù)正常。第1-9天CS組與CC組無(wú)顯著性差異(P>0.05),說(shuō)明手術(shù)對(duì)大鼠的步態(tài)沒(méi)有影響。4.海馬CA3區(qū)突觸素(SYN)的免疫表達(dá):海馬CA3區(qū)SYN免疫反應(yīng)陽(yáng)性產(chǎn)物的光密度(A)值,第20天CM+VB6組高于CM組(P<0.05)。第5、10、20天,CM+VB6組低于CC組(P<0.05)。CS組與CC組無(wú)顯著性差異(P>0.05)。 結(jié)論:1.VB6可改善腦癱幼鼠的運(yùn)動(dòng)功能障礙,步態(tài)異常逐
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