載藥EPCs生物工程捕獲支架在動(dòng)物體內(nèi)早期內(nèi)皮化性能的初步研究.pdf

1、前言:
　　 血管阻塞性病變是一種對(duì)健康危害極大、自然預(yù)后差的常見(jiàn)疾病,隨著社會(huì)人口老齡化,這類(lèi)疾病的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)。經(jīng)過(guò)多年的臨床應(yīng)用,藥物洗脫支架(drug-elutingstent,DES,特別是雷帕霉素支架)大大降低了血管再狹窄率(3-5%),表現(xiàn)出了廣闊的臨床應(yīng)用前景。然而,藥物洗脫支架在抑制內(nèi)膜增生的同時(shí),也抑制了血管正常的內(nèi)皮化進(jìn)程,造成了DES置入后“內(nèi)皮化延遲”現(xiàn)象,并相應(yīng)地引起了“晚期血栓形成”等致命性

2、并發(fā)癥的發(fā)生。
　　 目前,一項(xiàng)新的促內(nèi)皮化技術(shù)引起了國(guó)內(nèi)外介入放射學(xué)界的廣泛關(guān)注,這就是通過(guò)動(dòng)員外周血中EPCs到損傷血管局部位快速修復(fù)血管內(nèi)皮。Kutryk等利用抗原抗體結(jié)合反應(yīng)原理,在支架上涂層CD34+抗體以迅速吸附與捕獲外周血中CD34+的EPCs,并在極短時(shí)間內(nèi)完成支架內(nèi)皮化。但隨之一個(gè)不容忽視的問(wèn)題出現(xiàn)了:EPCs在快速修復(fù)內(nèi)皮的同時(shí),也誘發(fā)了內(nèi)膜過(guò)度增生,因此極易發(fā)生血管再狹窄。
　　 目的:
　　

3、 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立小型豬冠狀動(dòng)脈再狹窄動(dòng)物模型,來(lái)評(píng)價(jià)載藥EPCs生物工程捕獲支架能否在抑制內(nèi)膜增生的同時(shí),發(fā)揮早期快速內(nèi)皮化作用。
　　 方法:
　　 選用27只25公斤以上的健康小型巴馬豬作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(全雄性)選擇左或右冠狀動(dòng)脈置入支架。實(shí)驗(yàn)組:共9只,置入CD34+抗體-雷帕霉素支架。對(duì)照組:共18只,分為2組,每組9只。對(duì)照組A:置入雷帕霉素金屬支架;對(duì)照組B:置入CD34+抗體金屬支架。本實(shí)驗(yàn)采用國(guó)際公認(rèn)的小型

4、豬冠狀動(dòng)脈球囊過(guò)度擴(kuò)張?jiān)侏M窄模型。隨訪終點(diǎn)時(shí)間:1周、2周進(jìn)行掃描電鏡觀察.內(nèi)皮化評(píng)估和4周用于組織病理學(xué)研究-再狹窄評(píng)估。
　　 結(jié)果:
　　 一、一般狀況
　　 27只小型豬手術(shù)操作均順利,所有支架均成功置入,術(shù)中即刻造影血管通暢。各觀察終點(diǎn)復(fù)查時(shí)冠狀動(dòng)脈造影未見(jiàn)血管完全閉塞。處死動(dòng)物后,心臟大體標(biāo)本未見(jiàn)心肌梗死等明顯異常,支架置入處未見(jiàn)明顯組織增生。
　　 二、掃描電鏡結(jié)果
　　 1、1周觀

5、察終點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果
　　 掃描電鏡觀察,各組支架的內(nèi)皮覆蓋已經(jīng)出現(xiàn)了差異:首先雷帕霉素支架表面可見(jiàn)少量?jī)?nèi)皮覆蓋,而且內(nèi)皮細(xì)胞間連接不緊密,排列較紊亂,但炎性細(xì)胞少見(jiàn)。然而,新型支架內(nèi)皮化程度較雷帕霉素支架明顯提高,內(nèi)皮細(xì)胞間連接相對(duì)比較緊密,排列較規(guī)則,部分可見(jiàn)典型梭形改變。對(duì)比之下,抗體支架內(nèi)皮覆蓋率最高。
　　 2、14天隨訪終點(diǎn)結(jié)果
　　 從掃描電鏡觀察可以看出,各組支架的內(nèi)皮覆蓋程度均比1周觀察終點(diǎn)時(shí)明顯提

6、高,細(xì)胞連接更緊密,部分內(nèi)皮細(xì)胞已相互連接進(jìn)而形成了新生內(nèi)皮組織,特別是新型支架和抗體支架變化較明顯。然而,我們同時(shí)也發(fā)現(xiàn)各組支架仍然存在不同程度的內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)發(fā)育畸形、排列紊亂,易脫落等現(xiàn)象,以雷帕霉素支架組為主,這間接反映出新生內(nèi)皮功能缺陷。
　　 三、組織病理結(jié)果
　　 組織病理學(xué)顯示新型支架新生內(nèi)膜面積明顯小于抗體支架對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組新生內(nèi)膜面積為1.94±0.84mm2,而抗體支架對(duì)照組新生內(nèi)膜面積為2.80±0

7、.374mm2(P=0.024),兩者之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。同時(shí)在新生內(nèi)膜厚度和狹窄面積百分比(%)方面評(píng)估上看,新型支架分別為184.53±87.29μm、20.51±9.43%,而抗體支架對(duì)照組分別為276.25±108.36μm、33.74±11.85%(P=0.022,P=0.031),兩者之間依然存在較明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 結(jié)論:
　　 本研究表明載藥EPCs生物工程捕獲支架置入實(shí)驗(yàn)用小型豬體內(nèi)在早期階段是安